生物化工工艺学--第2章--工业微生物基础下.pptVIP

2 固体培养 固体培养：将微生物接种在固体培养基上。 特点：设备简单、投资少，适合于小规模生产，但占地面积大，劳动强度大，产品质量不太稳定。 3 液体深层培养----多用于工业生产 液体深层培养：把菌种接种到发酵罐中，使菌体细胞游离悬浮在液体培养基中，并进行生长的一种培养方法。深层液体培养一般需要通入空气并进行搅拌。 特点：可根据微生物需要合理调节生长条件，把微生物的生长、代谢控制在最佳状态而收到较好的培养效果。 二 菌种的扩大培养 种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。 种子扩大培养的概念: 1 概述 种子扩培的目的 接种量的需要 菌种的驯化 缩短发酵时间、保证生产水平 种子的要求： 总量及浓度能满足要求 生理状况稳定，个体与群体 活力强，移种至发酵后，能够迅速生长 无杂菌污染 2 种子的制备过程 实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此现象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。 生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。 3 斜面菌种的培养 4 一级种子的培养----摇瓶生产 通常在无菌室内进行。 生产中使用的斜面菌种不宜多次移种，一般只移接三次，避免由于菌种的自然变异引起菌种的不纯。 一级种子的培养通常用三角瓶进行液体恒温振荡，也称摇瓶。 三角瓶中的菌种由斜面培养的种子接入。 在某些发酵产品中，一级种子不用三角瓶，而是培养大型斜面（茄子瓶斜面）作为一级种子使用。 5 二级种子的培养----种子罐生产 一种子罐的大小根据发酵产品和发酵罐的容积配套确定。（如1%） 种子罐种子培养成熟后，需要检验种子的质量，如细胞形态、pH值。 在原料方面：不如实验室阶段那么精细，而是基本接近于发酵培养基，这有两个方面的原因:一是成本；二是驯化。 6 种子罐级数 定义：制备种子需逐渐扩大培养的次数。 级数对发酵的影响：（1）种子罐的级数越少，越有利于简化工艺和控制，并可减少由于多次移种而带来染菌的机会。 （2）同时还需考虑缩短种子发芽、生长而占用的非生产时间，延长发酵罐最终代谢产物积累的时间，以提高发酵的生产率。 发酵级数确定的依据 级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量的影响。 级数大，难控制、易染菌、易变异，管理困难，一般2-4级。 在发酵产品的放大中，反应级数的确定是非常重要的一个方面。 7 接种量 移入种子的体积 接种量＝ ————————— 接种后培养液的体积 双种：两个种子罐接种到一个发酵罐中。 倒种：一部分种子来源于种子罐，一部分来源于发酵罐。 接种量的大小决定于生产菌种在发酵罐中生长繁殖的速度，采用较大的接种量可以缩短发酵罐中菌丝繁殖达到高峰的时间，使产物的形成提前到来，并可减少杂菌的生长机会。 但接种量过大或者过小，均会影响发酵。过大会引起溶氧不足，影响产物合成；而且会过多移入代谢废物，也不经济；过小会延长培养时间，降低发酵罐的生产率。 8 种龄 种龄是指种子罐中培养的菌体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。 种龄短：菌体太少； 种龄长：易老化。 原则：对数生长期末，细胞活力强，菌体浓度相对较大，但是最终由实验结果确定。 问题 1、工业菌种育种的方法有哪些？ 2、菌种保藏的方法有哪些？ 3、微生物的培养方法有哪些？ 4、什么叫种子？ 5、种子的扩大过程 第三节 工业微生物菌种的分离和选育 获得菌种的途径： （1）向菌种保藏机构索取有关菌株。国内：工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）；农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC） ；中国微生物菌种保藏管理委员会（CCCCM） 。国外：美国典型菌种保藏保藏中心（ATCC）；日本大阪发酵研究所（IFO）等。 （2）从自然界中筛选。 （3）从一些发酵制品中分离目的菌株。 工业化生产对微生物菌种的要求： （1）能在廉价原料制成的培养基上迅速生长，并生成所需代谢产物，产量高。 （2）可在易于控制的培养条件下迅速生长和发酵。 （3）生长速度和合成速度较快，发酵周期短。 （4）选育抗噬菌体能力强的菌株，使其不易感染噬菌体。 （5）菌种不易变异退化，以保证发酵生产和产品质量的稳定性。 （6）菌种不是病原菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素，以保证安全。 （7）菌种应在短期内（最好3天或更短）生产出目的产物。 一 微生物菌种的分离 从自然界分离新菌种的一般步骤: 采样?富集培养?纯种分离?性能测