DNMT1和DNMT3b基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响.pdfVIP

·19· ·胰腺外科· DNMTl和DNMT3b基因干扰对胰腺癌 BxPC一3细胞增殖和凋亡的影响 肖卫东 李勇 邹叶青 李学明 蔡军 曾林山 【摘要】 目的观察DNA甲基转移酶1(DNMTI)和DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因干扰对 胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法利用LipofectamineTM2000转染DNMTI和DNMT3b小 分子干扰RNA(siRNA)至胰腺癌BxPC-3细胞。实验共分5组：DNMTI干扰组(转染DNMTI-siRNA)、 (转染negative·siRNA)和空白对照组(转染脂质体)。转染48h后，应用荧光定量聚合酶链反应 blot法分别检测细胞中DNMTI、DNMT3b (PCR)法和Western mRNA和蛋白的表达水平；噻唑蓝 (M1rr)比色法检测细胞体外增殖活力；流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与空白对照组和阴性对 照组比较，各干扰组的DNMTl和(或)DNMF3bmRNA及蛋白表达量均显著降低(P0．01)。 DNMTI干扰组和双系十扰组的细胞生长抑制牢分别为30．9％和28．3％，均显著高于DNMT3b干扰 组的14．5％(P0．01)，而DNMTl干扰维和双重f扰组之间差异无统计学意义(P0．05)。空白 对照组、阴性对照组、DNMTl干扰组、DNMT3b千扰组和双重干扰组的细胞凋亡率分别为3．74％、 5．07％、44．46％、24．20％和39．24％，各干扰纽的细胞凋亡宰均比对照组显著增加(P0．01)， DNMTl干扰组与双蓖十扰组的细胞凋亡率均显著高于DNMT3b干扰组(P0．01)，而DNMTl干扰 组与双重干扰组之间差异无统计学意义(P0．05)。结论DNMTl和(或)DNMT3b基因表达下调 后，能抑制胰腺癌BxPC．3细胞生长，并能诱导细胞凋亡。DNMTl单干扰的抑癌作用优于DNMT3b 单干扰，DNMTI和DNMT3b双重十扰允明娃的协同效应。 【关键词】胰腺肿瘤；DNA甲基转移酶；RNA十扰；增殖；脱噬作用 Effectof DNMTlandDNMT3bonthe and of ear- silencing gene proliferationapoptosispancreatic BxPC-3cells cinoma RNAinterference by XlAl)Wet-如ng‘，uYo鸭，ZOUYe—qing．L}Xue一盹嘈。 cAi General First Uni- Jun．zENGLin·shan．‘Departmentof Affili疵aHospitalofNanchang Surgery。the 330006，China 雠”ity，Nanehang Correspondingaughor：xIA0Wei．dong．Email：frankxwd@|26．com To theeffectof DNA transferas Objective silencingmethy l(DNMTI) 【Abstract】 investigate andDNMT3bonthe and of carcinomaBxPC一3cellsRNAinterfer- gene proliferationapoptosispancreatic by DNMTIandDNMT3b．siRNAweretransfectedintoBxPC-3cellsmediated ence．Methods