磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯.pptVIP

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2017-12-31 发布于境外
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磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯.ppt

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磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯

实验四磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯临床生物化学实验室一、实验目的掌握：磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯的基本原理。熟悉：磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯的基本操作。了解：血清甘油三酯测定对于家族性脂类代谢紊乱等疾病诊断的临床意义。二、实验原理　血清中甘油三酯(TG)经脂蛋白酶(LPL)作用，可水解为甘油和游离脂肪酸，甘油在ATP和甘油激酶的作用下生成3-磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶作用生成磷酸二羟丙酮和H2O2，H2O2与4-APP和 ESPAS 在过氧化物酶作用下，生成红色醌类化合物，其显色程度与TG的浓度成正比。　　甘油三酯过氧化物酶POD ATP ADP 甘油激酶GK LPL 甘油+酯肪酸 3-磷酸甘油磷酸甘油氧化酶GPO 磷酸二羟丙酮+H2O2 4-氨基安替比林（4-AAP）对氯酚/ESPAS 醌亚胺染料三、试剂 1. 酶试剂： GOOD′s缓冲液（pH7.2） ≥ 30mmol/L 甘油激酶 ≥ 1KU/L 脂蛋白酯酶 ≥ 3KU/L 甘油磷酸氧化酶 ≥ 2KU/L 过氧化物酶 ≥ 2KU/L ATP ≥ 0.5mmol/L 4-AAP ≥ 0.3mmol/L ESPAS ≥0.2mmol/L 稳定剂适量 2. 标准液：甘油三酯 2.26 mmol/L 五、结果计算　　　　　　　　　　 TG(mmol/L)＝āU/āS×Cs（2.26 mmol/L）参考范围：血清TG:0.565－1.695 mmol/L 六、注意事项 1. 本法使用的酶试剂在4℃避光保存，至少可稳定3-7天，出现红色时不可再用，试剂空白的吸光度应≤0.05。 2. 血清要及时测定， 4℃存放不超过3天，避免TG水解释放出甘油。 3. 本法线性上限为11.3mmol/L，若所测TG超过了11.0mmol/L, 则可用生理盐水稀释后再测。