Nodal基因干扰对肝癌细胞生物学行为及血管生成拟态的影响.pdfVIP

主垡萱道窆E型苤壶垫!兰生!旦筮!!鲞筮!翅垦!垫!鱼翌坠盥：!!!坐型垫!!：!堂：!!：堕!：! ·119· ．肝癌诊治． Nodal基因干扰对肝癌细胞生物学行为及 血管生成拟态的影响 陈启斌 荚卫东 许戈良 李建生 马金良 刘文斌王修军 【摘要】 目的探讨利用Nodal基因表达预测肝癌转移复发的可行性。方法通过RNA干扰 技术对人肝癌细胞Nodal基因表达的沉默，观察对肝癌细胞生物学行为及血管生成拟态形成的影响。 设计4条Nodal基因特异干扰序列，通过质粒载体转染人肝癌细胞株SMMC-7721，分别以实时荧光定 量PCR和Western blot检测Nodal基因和蛋白的表达水平。观察Nodal基因干扰对肝癌细胞增殖、凋 亡、侵袭、迁移能力及血管生成拟态的影响。结果RNA干扰明显抑制了肝癌细胞Nodal基因的表 达。在增殖实验第4、5、6天，干扰组的增殖率明显低于对照组(分别F=17098．922，18135．107， 32641．075，均P0．05)。转染48h后，干扰组凋亡率明显高于对照组(F=1136．452，P0．05)。在 侵袭和迁移试验中，干扰组穿过transwell小室的细胞数明显低于对照组(分别F=83．6，1126．857，均 P0．05)；转染24h和48h后，干扰组均未形成血管生成拟态，明显区别于对照组。结论干扰 ． Nodal基因的表达，可明显抑制肝癌细胞的生物学行为及血管生成拟态的形成。 【关键词】癌，肝细胞；RNA，小分子干扰；基因表达 of Effectsnodsl RNAinterferenceon behaviourand ofhuman gene biological vasculogenicmimicry carcinomacellsCHEN hepatoceHular Qi—bin，皿4耽i·而增，XUC．e—liang，LI．，施n—sheng，MA五玎一 Provincial liang，Ⅱu眈n—bin，黝ⅣGXiu-jun．DepartmentofHepaticSurgery，AnhuiHospital，Anhui Medical University，Hefei230001，China author：JIA CorrespondingWei—dong，E—mail：jwdl968@sina．eom Toevaluatetheroleofnodal ofa 【Abstract】0bjective genemodulatingmalignancyhepatocellular carcinomacelllinesSMMC7721．MethodsTosilencethe ofnodal inhuman expression gene carcinomacellsRNA toobservetheeffectoncells hepatocellular by interference(RNAi)，and biological ofnodal behaviourand mimicry．4 vectors gene smallinterferenceRNA vasculogenic expression targeting wereconstructedandtr