2015细胞生物学实验.docxVIP

实验一线粒体和液泡系的超活染色[实验目的]1、学习一些细胞的超活染色技术。2、通过超活染色观察活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。[实验原理]活体染色是指对生活有机体的细胞或的某些结构组织能着色但又无毒害的一种染色方法。它的目的是显示生活细胞内的某些结构。而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。但不是任何染料皆可以作为活体染色剂之用，应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，而且总是要配成稀淡的溶液来使用。一般是以碱性染料最为适用，可能因为它们具有溶解在类脂质（如卵磷脂、胆固醇等）的特性，易于被细胞吸收。站那思虑B和中性红两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料，对于线粒体和液泡系的染色各有专一性。[仪器、材料与试剂]1、仪器：显微镜、恒温水浴锅2、材料：洋葱鳞茎内表皮细胞、黄豆幼根根尖、载玻片、盖玻片、10ml量筒、吸管、吸水纸黄豆幼根根尖培养方法：将黄豆种子用温水泡胀后，培养在培养皿内多层润湿的滤纸上（水稍淹住黄豆为宜），30℃使其发芽，3~4天后，胚根伸长到1cm以上。3、试剂：⑴ Ringer溶液（装入滴瓶）氯化钠 0.85g氯化钾 0.25g氯化钙 0.03g蒸馏水 100ml⑵ 1%、1/3000中性红溶液（装入棕色滴瓶）称取0.5g中性红溶于50ml