微生物 第九章 微生物的药学应用2.ppt

国内企业常见缺陷 灭菌工序 无包装规格 无装载方式 未对每一种产品每一种包装规格的每一种装载方式进行验证 采用留点温度计监测温度 无温度探头校准记录 验证的灭菌工艺与实际工艺不一致 未验证最差灭菌条件 设定的验证合格标准达不到无菌保证水平（SAL）10-6 生物指示剂使用不规范 无菌检验的检查要点 无菌室及环境监控 取样计划 取样量和检验量 培养基和菌种管理 无菌检验方法 样品表面消毒处理 阳性检验结果的调查和处理 国内企业常见缺陷 未建立各产品的无菌检验方法 仅抄录《中国药典》“无菌检查法”附录 成品的检验操作规程中无菌检查项目无具体操作程序 无菌检验方法不合理，未考虑产品本身的抑菌作用 未对无菌检验方法进行验证 未测试培养基的灵敏度 未对每柜灭菌产品进行取样并进行无菌检验 无菌检验记录作假 无菌种分离鉴别的条件 出现阳性结果时的调查不完整 物料的检查要点 物料的质量标准 物料的来源 物料的取样和检验 物料的供应商审计 物料供应商的变更 国内企业常见缺陷 未根据产品特性、用途、工艺设定质量标准 物料质量标准缺少鉴别和安全性指标 砷盐、重金属、细菌内毒素 重成品检验，轻物料检验 未经取样的物料贴有取样证 取样方法不规范 含量等检验未做平行试验 供应商审计流于形式，随意变更供应商 无经质量部门批准的合格供应商清单 中间产品的质量控制 无菌药品应特别注意监控中间产品微生物和细菌内毒素污染情况 已配制的中间产品含量检测极为关键 澄清度检查 可见异物检查 应100％检查 可制备含有可见异物的标准样品对操作人员进行培训 人员的检查要点 人员的培训 人员的卫生习惯 体检档案和汇总 洁净区内人员的工作服及穿着 无菌操作 无菌更衣程序验证 国内企业常见缺陷 无菌工作服穿着不规范 未对无菌更衣进行监控 无菌操作不规范  药品的微生物学检查 无菌检查 微生物限度检查法 药物的微生物学检查包括 无菌检验、 细菌总数测定、 真菌总数测定、 病原菌的检验、 螨的检测。 一、无菌制剂的无菌检查 各种注射剂、手术用滴眼剂要求无菌、无热原质，尤其是直接注入病人血管内的注射剂，如被微生物或热原质污染即有可能引起发热、菌血症、中毒性休克甚至死亡等等。因此药典规定出厂前都必须做无菌检查以确保安全。 1 无菌检查的基本原则： 在无菌操作情况下将被检测的药品，按其剂型的不同分别取一定量加入适合各类微生物生长的不同培养基（需氧菌、厌氧菌及真菌培养基）中，在各自适宜的条件下进行培养。在规定时间内观察有无微生物生长，以判断药品是否符合要求确为无菌。 2 无菌检查的基本方法 （1）一般药品的无菌检查 系指本身不含任何抗菌或抑菌成分，而且其为水溶性的药品的无菌检查。 （2）特殊药品的无菌检查法 油类药物的无菌检查 抗菌药物或含防腐剂药物的无菌检查 （1）一般药品的无菌检查 ——直接接种法 用无菌操作法吸取一定量的药物加入各种培养基内在适宜的温度下培养，并每天观察作出记录。 如在规定时间内无任何微生物生长则可判定待检药品符合标准. 需氧菌、厌氧菌：37℃　　５天 真菌： 25℃　　７天 需氧菌和厌氧菌的培养已全部采用硫乙醇酸钠培养基检查。在同一培养基中，需氧菌在培养基表面生长，而厌氧菌在培养基内生长。 真菌检查用真菌培养基 硫乙醇酸钠培养基 硫乙醇酸钠 还原剂 亚甲蓝 氧化还原指示剂 下层 －－ 厌氧 －－ 无色 上层 －－ 需氧 －－蓝绿色 阳性对照： 需氧菌：藤黄八叠球菌 厌氧菌：产芽胞杆菌 真菌： 白色念珠菌 方法：在培养基中加入对照菌。 意义：阳性对照必须长菌，证明微生物确实可在应用的实验条件下生长。 阴性对照： 　　用未加药物和对照菌的培养基 意义：证明培养基本身无菌。 　 （2）特殊药品的无菌检查法 ①油剂性药物的检测 因难于和培养基充分混合，往往影响检出结果。 加入吐温80，与油剂性药物混合乳化，再用培养基稀释，可以使药品均匀分布在培养基中。 对照：吐温80 。 ②含抑菌或防腐成分药物的检测 药品本身含有抑菌成分，或于制作过程中加入防腐剂等，如按上法检测往往不能证明它们是否真正无菌 ，必须先经一定的处理。 灭活法、稀释法、微孔滤膜过滤法和离心沉淀集菌法 薄膜滤菌器 二、口服药及外用药物的微生物学检查 主要是微生物限量检验。 我国规定的项目有: 细菌总数测定 真菌总数测定 控制菌的检验 活螨的检验 判断合格标准： 口服药、一般眼科制剂及外用药中微生物总量须低于规定限量， 口服药物每克或每毫升中不得含有大肠杆菌、沙门菌； 外用药物每克或每毫升中不得含有铜绿假单胞菌、金黄葡萄球菌和破伤风梭菌； 此外均