任务六 治疗用生物制品制备.pptVIP

任务六 治疗用生物制品制备;1.免疫血清制造程序与方法 ;分装 ;1.1 免疫动物的选择 制备免疫血清的动物有马、牛、山羊、绵羊、猪、兔、犬、鸡和鹅等。为了避免疫病的传播，制备抗血清时，一般要求用异种动物，通常用马和牛等大动物制备。 通常选择体型较大、性情温驯、体质强健的青壮年动物为宜。同时，需对相应的动物传染病进行检疫。 在生产过程中，若发现健康状况异常或有患病可疑时，应停止使用，并进行隔离治疗。;1.2 免疫抗原的制备 （1）细菌免疫原制备 基础免疫用抗原多为疫苗或死菌，而加强免疫的抗原，一般选用毒力较强的菌株。多价抗病血清用的抗原，要求用多血清型菌株。菌种接种于最适生长的培养基，按常规方法进行培养。;（2）病毒免疫原制备 以病毒为免疫原，须通过反复冻融或超声裂解方法，将病毒从细胞中释放出来，并尽可能地提高病毒滴度和免疫原性。如抗猪瘟血清，基础免疫的抗原，可用猪瘟兔化弱毒疫苗；加强免疫抗原，则用猪瘟血毒或脾淋毒乳剂等强毒。猪接种猪瘟强毒发病后5～7d，当出现体温升高及典型猪瘟症状时，由动脉放血，收集全部血液，经无菌检验合格后即可作为抗原使用。;1.3 免疫程序 免疫程序分为两个阶段，第一阶段为基础免疫，第二阶段为加强免疫。从被免疫动物初次接受免疫原刺激，到产生少量抗体，这段时间在制造程序中称为基础免疫。基础免疫对第二阶段的加强免疫有重要关系。;（1）基础免疫 通常先用本病的疫苗按预防剂量作第一次免疫，经1～3周再用较大剂量的灭活苗或活菌或特制的灭活抗原再免疫1～3次，即完成基础免疫。基础免疫大多数1～3次即可，抗原无须过多过强，可为加强免疫产生有效的回忆应答打下基础。;（2）加强免疫 亦称高度免疫。 一般在基础免疫后2～4周开始进行。注射的抗原可采用灭活抗原，也可采用强毒微生物。免疫剂量逐渐增加，每次注射抗原间隔时间多为5～7d，加强的注射次数要视血清抗体效价而定。 在用强毒微生物进行加强免疫时，必须在强毒动物舍或负压隔离器中进行，并采取严格的控制措施，以防散毒。;;1.4 血液采集与血清提取 按照免疫程序完成免疫的动物，经采血检验（试血），血清效价达到合格标准时，即可采血。不合格者，再度免疫，多次免疫仍不合格者淘汰。;（1）采血次数和方法 一般血清抗体的效价高峰在最后一次免疫后的7～10d。 采血可以全放血或部分采血，即一次采集或多次采集，尽可能作到无菌操作。 多次采血者，按体重每千克采血约10mL，经3～5d第二次采血，第二次采血后经2～3d，再注射免疫原，如此循环注射免疫原和采血。 全放血者，在最后一次高免之后的8～11d进行放血。放血前，动物应禁食24h，但需饮水以防止血脂过高。;（2）血清的分离 采血时一般不加抗凝剂，全血在室温中自然凝固。先置于37℃ 1～2h，然后置于4℃冰箱过夜，次日离心收集血清。 如果采集的血量较大时，可采用自然凝固加压法。即将动物血直接采集于用生理盐水湿润的灭菌玻璃筒内，置室温自然凝约2～4ｈ，有血清析出时，采血筒中加入灭菌的不锈钢压砣，经24h后，将血清吸入灭菌瓶中，加入0.5%石炭酸或0.02%硫柳汞防腐。抽样进行无菌检验，无菌的血清，组批分装，保存于2～8℃。;2. 卵黄抗体制备 ; 卵黄抗体生产工艺流程图 ;鸡传染性法氏囊病卵黄抗体的制备;;2.3 抗体制备 将高免蛋用0.5%新洁尔灭溶液清洗消毒，再用酒精棉擦拭蛋壳，无菌操作取卵黄，用组织捣碎机充分捣匀，用灭菌纱布过滤除去杂质，根据卵黄抗体效价水平加入无菌生理盐水进行稀释，稀释后的卵黄抗体琼扩效价不低于1:16～1:32，加青霉素、链霉素至1000IU（μg）/mL，加硫柳汞浓度达0.01%，充分搅拌后分装，于4℃保存。经检验合格后出厂。