植物组织培养组织培养.ppt

植物组织培养 植物组织培养：指在自然环境中将从植物体上分离出的器官、组织、细胞在人为的无菌条件下，将其置于含有培养基的容器中，使其能生长发育的一种技术。 细胞全能性：任何一个完整的植物细胞，都具有形成一个完整植株的全部遗传信息。 脱分化：由一个成熟细胞转变为分生状态的过程。 主要仪器 酸度计 灭菌装置 超净工作台 摇床等 手提式灭菌锅 超净工作台 酸度计 显微镜 培养基及其配制 主要内容： 培养基的成分 培养基的配制 1、培养基母液的配制 2、培养基的配制 培养基的成分 大量元素 微量元素 氨基酸和有机附加物 植物激素（植物生长调节剂） 维生素类 凝固剂 大量元素（以MS培养基为例） 微量元素（以MS培养基为例） 氨基酸和有机附加物（以MS培养基为例） 植物激素（植物生长调节剂） 1、生长素类：IAA，IBA，2，4-D，NAA等。 2、细胞分裂素类：KT，6-BA，ZT等。 3、赤霉素类；GA1-GA4，GA7，GA9-GA16，GA24，GA25等 4、脱落酸：ABA 5、乙烯 6、PH值：5.6-5.8 培养基的配制 母液（储备液）的配制与保存 培养基配制 MS培养基配方 大量元素：配制20×母液 备注：为避免沉淀，钙盐可单独配制 微量元素：配制100×母液 铁盐：配制50×母液 备注：将EDTA和FeSO4分别加热溶解，再混合。 有机物：配制1000×母液 备注：肌醇用时直接称取，不需配制母液。 植物生长物质：配制1mg/ml母液 备注：加少量稀酸/碱，搅拌（涡旋）溶解，加蒸馏水稀释、定容。 培养基的灭菌 高温高压蒸汽灭菌：121℃，1.1Kg/c㎡，15-20分钟，时间过长，培养基成分易变性失效。 过滤灭菌：在高温高压下易分解的培养基和激素类。 外植体的接种和培养 愈伤组织和芽的产生 小苗的产生 完整植株的获得 移栽 其他 植物组织培养的应用 快速无性繁殖 培育新品种 药用植物有效成分生产 * * 显微镜 440 二氯化钙 CaCL2.2H2O 5 370 硫酸镁 MgSO4.7H2O 4 170 磷酸二氢钾 KH2PO4 3 1650 硝酸铵 NH4NO3 2 1900 硝酸钾 KNO3 1 用量mg/l 化学名称 化学式 序号 0.025 CoCL2.6H2O 氯化钾 7 0.025 CuSO4.5H2O 硫酸铜 6 0.25 Na2MoO4.2H2O 钼酸钠 5 8.6 ZnSO4.7H2O 硫酸锌 4 22.3 MnSO4.4H2O 硫酸锰 3 6.2 H3BO3 硼酸 2 0.83 KI 碘化钾 1 用量（mg/l) 化学式 化学名称 序号 0.5 NC5H4COOH 烟酸 5 0.5 C8H11O3N.HCL 盐酸吡哆醇 4 0.1 C12H17CLN4OS.HCL 盐酸硫胺素 3 2 NH2.CH2.COOH 甘氨酸 2 100 C6H12O6.2H2O 肌醇 1 用量(mg/l) 化学式 化学名称 序号 7.4 370 MgSO4.7H2O 8.8 440 CaCl2.2H2O 3.4 170 KH2PO4 38 1900 KNO3 33 1650 NH4NO3 20× （g/L） 1×（mg/L） 成分 2.5 0.025 CoCl2·6 H2O 2.5 0.025 CuSO4·5H2O 25 0.25 Na2MoO4·2H2O 860 8.6 ZnSO4·7H2O 2230 22.3 MnSO4·4H2O 620 6.2 H3BO3 83 0.83 KI 100×（mg/L） 1×（mg/L） 成分 1.39 27.8 FeSO4·7H2O 1.86 37.3 Na2-EDTA 50× （g/L） 1×（mg/L） 成分 2.0 2.0 甘氨酸 100 肌醇 0.1 0.1 烟酸硫胺素（VB6） 0.5 0.5 盐酸吡哆醇（VB1） 0.5 0.5 烟酸 1000× （g/L） 1×（mg/L） 成分 HCl NaOH 溶剂 0.1 1.0 2,4-D 0.1 0.04－10 6-BA 母液(g/100ml) 1×（mg/L） 成分