芸香苷对人晶体上皮细胞氧化损伤和凋亡保护作用的初步研讨.pdfVIP

安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2013Apr；48(4) ·379 · 芸香苷对人晶体上皮细胞氧化损伤和凋亡保护作用的初步研究 喻亚梅，周艳峰 摘要 目的 研究黄酮类化合物芸香苷 (Ru)对过氧化氢 1．1．1 实验细胞 SRA01_()4系人晶体上皮细胞株 (H：0：)诱导的人晶体上皮细胞(HLEC)氧化损伤和凋亡的 (humanlensepithelialcells，HLEC)，由上海复蒙基 保护作用。方法 用不同浓度Ru(0、25、50、100Ixmol／L)预 因生物科技有限公司提供。 处理HLEC1h，再加入200tzmol／LH2O2，分别检测各组细 1．1．2 药品及试剂 Ru(南京泽朗医药科技有限 胞增殖活性以及超氧化物歧化酶 (SOD)、还原型谷胱甘肽 (GSH)、丙二醛 (MDA)水平，观察细胞凋亡形态并计算凋亡 公司产品)，纯度 98％；30％分析纯 H202(上海 中 指数(AI)。结果 200Ixmol／LHO 组 HLEC增殖能力及 试化工总公司产品)；DMEM培养液、胎牛血清 (美 SOD、GSH含量较对照组显著下降，MDA和 AI较对照组明 国GIBCOBRL产品)；0．25％胰蛋 白酶 (碧云天生 显增高(P0．O1)；Ru预处理组与H0：组相 比，细胞生存 物技术研究所产品)；3．(4，5一二甲基噻唑．2)-2-5．二 率 、抗氧化水平 明显提高，凋亡细胞数量显著减少 (P 苯基四氮唑溴盐 (M1_r)、二甲基亚砜 (DMSO)均为 0．01)。结论 Ru通过提高细胞增殖能力保护 H0 引起 美国Sigma公司产品；脱氧核糖核苷酸末端转移酶 HLEC的氧化损伤和凋亡。 介导的缺 口末端标记 (TdT-mediateddUTPnickend 关键词 晶体上皮细胞 ；芸香苷；过氧化氢；氧化损伤；细胞 凋亡 labeling，TUNEL)试剂盒(德国Roche公司产品)；超 中图分类号 R776．1 氧化物歧化酶 (superoxidedismutase，SOD)测试盒、 文献标志码 A 文章编号 1000—1492(2013)04—0379—04 考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒(南京建成生物工程研 究所产品)；人丙二醛(Mal0ndialdehyde，MDA)、谷胱 白内障是我国临床眼病中最常见的致盲性眼 甘肽(glutathione，GSH)酶联免疫检测试剂盒 (美 国 病…。白内障的发生与晶体上皮细胞 (1ensepitheli． RD公司产品)。 alceils，LEC)氧化损伤和凋亡密切相关。LEC的氧 1．1．3 主要仪器 超净工作台(苏州净化设备有 化损伤及生化改变是年龄相关性 白内障形成的主要 限公司)；CO 培养箱(英国Kendro)；全 自动酶标仪 机制，而氧化损伤产生 的活性氧 (reactiveoxygen (美国Bio．RAD680)；可见光分光光度计 (上海光谱 species，ROS)是 引起 LEC凋亡 的重要诱 导 因 仪器有限公司)；免疫荧光显微镜 (日本Nikon80i)。 素 一 。 1．2 方法