猪Nramp1基因多态与免疫功能的相关性研讨.pdfVIP

中国畜牧兽医学会养猪学分会论文集 猪Nrampl基因多态与免疫功能的相关性研究 吴宏梅1王立贤1¨程笃学1孙鑫2马小军3 (1．中国农业科学院畜牧研究所，北京100094；2．商务部屠宰技术鉴定中心，北京100062； 3．甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州731)070) 摘要为了探讨Nrampl基因第六内含子多态在大白猪和松辽黑猪(由杜洛克、长白、民猪杂交合成)中的分布 及其与猪免疫抗病的关系，采用PCR-RFLP法对165头大自猪和109头松辽黑猪Nramp1基因第六内含子多态性 与免疫功能(中性粒细胞还原力和单核细胞细胞毒百分率)的相关性进行了研究。结果发现：两个品种在该位点均 存在多态性，品种间、合并基因型间免疫功能差异不大，但同—品种内不同基因型间差异显著；大白猪BB基因型 个体的单核细胞细胞毒百分率显著高于AB基因型个体(P0．05)，BB基因型个体的中性粒细胞NBT(硝基蓝四 氮唑)还原力值极显著高于AB基因型个体(尸均．01)，而在松辽黑猪中则是AB基因型个体的中J懒胞NBT还 原力值显著高于BB基因型个体(尸如．05)；死亡率分析显示大白猪BB基因型个概亡率明五班}于AB基因型个 体，松辽黑者则是AB基因型个体的死亡率明显低于BB基因型个体。以上结果提示。品种内不同Nrampl基因型 与免疫功能问存在着显著相关，Nrampl基因可作为抗病力性状的—个主要候选基因。 关键词猪NRAMPl基因PCR-RFLP免疫功能 近年来，随着分子遗传学的飞速发展、畜禽遗传图谱的不断完善和—些与疾病抗|生有关的基因或遗传 标记的相继发现，采用分子生物技术实施畜禽的抗病育种，以从遗传本质匕提高畜禽的抗病力已成为解决 这些问题的有效途径，而当前的主要任务之·便是寻找控制综合抗病力(畜禽先厌的、元病原特异陛的综 合防御能力)的主效基因或优秀候选基因。 associated resstance 天然抗性相关巨噬蛋白(natural macrophageprotein，Nramp)基因家族成员最初发 Nramp基因家族。Nramp1基因作为该家族的成员之一，可编码具有完整膜的磷酸糖蛋白，含有10-12个 推定的转膜区域，具有离子通道和转运功能特征，是—个较为保守的基因(Ⅵdal等，1996)o其主要存在 用机理戥恿过转运细菌自身合成防御酶系所必需的金属离子如Mn2+或R尹等使细菌麟成防御酶系，从 胞和噬中性粒细胞及外周血细胞中特异表达，既可影响动物的固有免疫，又与多种胞内寄生病原菌的抵抗 作用有关，而目．对疾病的抗性是非病原特异陛的，所以是猪综合抗病力的优秀候选基因之·。 敲除法证实人或小鼠中的Nrampl与一些病原寄生物如分枝杆菌中的结核杆菌等的易感性和抗性有关； nucleotide W．Liu等(2003)通过对鸡的单核苷酸多态陛(single 染病例组和对照组问的Nrampl基因多态性存在显著差异；Tatiane A等(2006)通过SSCA法分析荷斯坦 牛、瘤牛Nrampl基因3UTR区的遗传变异，发现不同品种间基因频率差异显著，且不同基因型对布鲁氏 菌的抗性和敏感陡差异显著。但这些研究多集中于小鼠、鸡、牛及狗上，而以猪Nrampl基因为功能基因 来研究基因结构与抗病陛j比件挟牲的研究报道很少。因此，本研究以松辽黑猪、大白两个中外绪种为试验 材料，采用限制性内切酶Nde 作者简介：吴宏梅(1980一)，女，博士研究生，研究方向为动物遗传育种与繁殖。 -j西讯作者：王立贤(1965一)，E—mail：iaswl—x@26—3,net。 遗传育种与繁殖 TetrazoliumReduction 毒作用、中性粒细胞NBT(Niuoblue Test，硝基蓝四氮唑)还原力等抗腐力指标及生 产性状的相关性进行分析，欲揭示免疫应答差异的分子基础，为利用标记辅助选择进行猪抗病育种提供科 学参考。 1材料和方法