猪水肿毒素A1亚基的可溶性表达及其表达产物的生物学特性研讨.pdfVIP

拼传染惦 菌转移剑机体内丑三常凶群，如消化道、呼吸道、泌尿生殖道的止常凶批；反过米耐约性也可以从机体止常 菌群转移剑病原凶，而且止常菌群终身寄生丁．动物体，接触抗凶药物的机会、次数比病原菌多，接触的H寸 问比病原菌早。冈此，止常菌群耐药性的产生早丁．病原菌。如果是这样，常在凶在耐药基因的传播扩散上 起到了极为重要的坏作jH。 3．3病原菌与常在凶的耐约性符合率较高，特别是磺胺嘧啶钠、土霉素这些应．1l』已久的抗凶药物完全相符。 磺胺嘧啶钠已产生广泛的耐药性，磺胺嘧啶钠属丁化学合成抗菌药物，从1935年发现第一个磺胺类药物 ——百浪多思到现在已有70年的历史。这种约物具有抗菌谱广、性质稳定、使用方便、价格低廉、国内 能够大量生产等特点，多年来被广泛川作备禽约物添加剂使用，违背抗菌药物的使用原则，是其产生耐约 性的根本原冈。 3．4病原菌和常在菌的高敏药物符合率较高，先锋氧氟沙星属丁．三环合成喹诺酮类抗曲药物，环丙沙星、 ：甑诺沙星属丁．第三代氟喹诺酮类新药，这三种约都是动物专川抗菌约物，．贝有抗菌谱广、杀菌力强、吸收 快、体内分布J，．、使用方便、不良反应小筲特点。由丁．其价格相对较高、又不作为留禽药物添加剂使川， 并且在兽医临床上麻}}j的时间不是太＆，药敏试验效果较好。但是，在应用这类抗菌约物时，会严重破坏 畜禽机体内的止常菌群，降低抗病力，建议在畜牧生产中不要盲日应川这类抗茵约物。 3．5本试验在进行常在菌的药敏试验时，由于条件所限，没进行常在菌个体差异的分析，尚需进一步完善。 参考文献略 猪水肿毒素A1亚基的可溶性表达及其表达产物的生物学特性研究 。 赵战勤·，吴斌··，刘国平，林艺远，周 锐，金梅林，陈焕春 (华中农业大学动物医学院农业微生物国家重点实验室 武汉·湖北430070) 且具有免疫学活性。将蛋白纯化后免疫新西兰大白兔，获得的抗血消能中和鄂E株产生的SLT-IIe从而阻 断其对Vero 经初步研究与应朋表明，该方法可用于猪血淌中SLT-IIe抗体的检测。 关键词：大肠杆菌，猪水肿病，SLT-IIe，可溶性表达，ELISA 仔猪水肿病是常见的一种猪传染病，该病的直接致病冈子是产志贺样毒素人肠杆菌(Shiga—like toxigenie 中心，其N端存在毒素的信号肽序列，C端存在一个参与毒素分子跨内质网膜运输的跨膜区弘j。SLT-IIe l弧基与核 通过其BⅡ单位与猪肠上皮细胞的特异性受体发生结合，介导A弧单位进入细胞核糖体，其A 糖体大皿基28SrRNA发生接触反应阻止氨酰tRNA与核糖体RNA结合，从而阻断细胞内蛋白质的合成， 导致细胞死亡【3l。本研究对猪水肿病大肠杆菌猪水肿毒素的AⅡ基进行了核苛酸和氨基酸序列分析，对 Al皿基进行了可溶性表达、纯化和生物学特性方面的研究，并以表达的可溶性蛋白为抗原建立了SLT-Ile 抗体的ELISA检测方法。 496 第六次全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 1材料与方法 1．1菌株和质粒 ‘． 质粒载体由本实验室保存。 1．2酶及主要试剂 ’ 各种限制性内切酶、TaqDNA聚合酶、pMDl8．T载体、T4 收试剂盒购自上海生工公司；阴性血清米自没有免疫猪水肿病疫苗的健康猪，猪抗SLT．1ie抗血清由本实 验室提供；HRP标记的羊抗猪lgG购自SBA公司；底物DAB为华美公司产品。 1．3 SLT-IIe的A亚基和Al亚基基因的克隆和序列分析 引物由上海生工合成。’ ‘ Prl：API，5’一ACCllAACTAAAAGGAATp汀A一3’ AP2，5’一TTCATTCACCAGTrG11AT』钔『A一3’ Pr2：A1Pl。5’一CCCGGATCCCAGGAG丁丌ACGATAGAC1vrT一3’ AlP2。5’一GG