猪源大肠杆菌 O157：H7与 O157的差异蛋白质组学分析研究.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2012年，第 31卷，第6期，第 53卜537页 GenomicsandAppliedBiology，2012，Vo1．31，No．6，531—537 研究论文 ResearchArticle 猪源大肠杆菌O157：H7与O157的差异蛋白质组学分析 谢宇舟 密克 李军 陈泽祥 许力干 杨威 闭炳芬 榻雄标 潘艳 胡帅 广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001 通讯作者，xjszexiang@163．tom 摘 要 为了阐述 O157：H7与 O157的致病力差异与蛋白质表达差异之间的关系，我们利用双 向电泳技术 和质谱技术对大肠杆菌两类菌株之间进行蛋 白质组学差异分析。菌体蛋 白经双 向电泳技术分离后，利用软件 ImageMasterMT2DPlatinum7．0对所得双 向电泳 图谱进行差异分析并借助质谱技术对差异蛋 白质点进行鉴 定，获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的菌体总蛋白的双向电泳图谱 。两样品图谱差异分析结果表明，共 确定了28个有效的蛋 白质差异点(Av．ratio2．0，ANOVA0．05)，经质谱鉴定将这 28个差异点注释成 23种 蛋白质。对得到注释的23种蛋 白质进行功能分类，发现 7类蛋 白质与致病性密切相关，即溶菌酶抑制剂、通 用应激蛋 白、LuxS、鞭毛蛋 白以及 3种外膜蛋 白。本结果将为进一步研究O157：H7菌株 的致病 因子，探究 O157：H7与其它大肠杆菌菌株的致病力差异，以及建立快速鉴别诊断O157：H7的试剂盒提供重要的依据。 关键词 大肠杆菌，肠出血性大肠杆菌，O157：H7，O157，蛋 白质组学，差异表达 DifferentialProteom icAnalysisbetweenEscherichiacoliIsolatesO157：H7 andO157from Swine XieYuzhou MiKe LiJun ChenZexiang XuLigan YangW ei BiBingfen XuanXiongbiao PanYan HuShuai GuangxiVeterinaryResearchInstitute，GuangxiKeyLaboratoryofAnimalVaccinesandNewTechnology，Nanning，530001 Correspondingauthor，xjszexiang@163．com DOI：10．3969／gab．031．000531 Abstract DifferentialproteomicanalysisbetweenE．colstrains0l57：H7andO157wascarriedout，inorderto clarifytherelationshipbetweenvirulenceanddifferentiallyexpressedproteinsofdifferentE．colistrains．Two— dimensiona1electrophoresisr2一DE)wasusedtoseparatebacterialproteinsandImageMasterMT2DPlatinum 7．0 softwareperfcIrmedvariation analysisoftheobtained 2D maDS．The differentially expressedproteinswere identifiedbymassspectrometry．The2D mapsofbacterialtotalproteinwithclearbackground，highresolutionand goodreproducibilitywereobtained．Thevariation analysisofwto sampleswasperformed andatotalOf28 differentiallyexpressedproteinspots(byfliterAv．ratio2．0andANOVA0．05)weredetected．Theseproteinspots were identified as23uniqueprotein rgoupsbymassspectrometry ．The functionalclassification ofannotated proteinsindicatedthatsevenkindsofproteinswerecloselyrelatedtobacterialviurlenceincludingC—lysozyme inhibitor。universa