桑树叶斑病防治PPT.pptVIP

云南桑树病菌初步鉴定及其对咪酰胺的敏感性测定 答 辩 人：陈文智 指导教师：杜 飞 2012年6月12日 园林园艺学院 本科论文答辩 汇报提纲 研究背景 结论与讨论 研究目的 研究内容 结果与分析 研究背景：在很多蚕区，桑树容易发生桑树叶斑病，影响桑树的生长发育，桑叶老化脱落，造成桑叶减产，叶质下降，蚕儿食下病叶后，吸收不到有利于蚕儿生长发育所需的营养，会降低蚕儿抗病的能力，影响蚕茧的产量和质量。 研究目的：采用咪酰胺不同浓度对桑树病菌的抑制率和EC50研究，为提高桑树的产量和质量提供理论依据。 研究内容：以云南保山、曲靖两地区带有叶斑病的桑叶为材料，采用菌落直径法，对杀菌剂咪酰胺的EC50进行测定。算出咪酰胺对病原菌的敏感性。 带病桑叶 试验技术路线图 植物保护学院何永红老师提供编号为SHB的病原菌 病原菌分离 病原菌活化 病原菌纯化 单孢分离 鉴定 形态鉴定 分子鉴定 农药测定 曲靖、保山、采集新鲜带病桑叶 5%NaClo处理 常温培养3～5天 显微镜下 常温培养3～5天 编号 名称 正面形态 背面形态 孢子堆 1 保2-2 粉红色 丝状 粉红色 黑色 较少 2 曲4-1-1 白色 丝状 白色 黑色 丰富 3 曲6-2-1 米白色 有轮纹 絮状 桔黄色 有轮纹 黑色 丰富 4 曲5-1-1 米白色 有轮纹 丝状 白色 黑色 丰富 5 曲5-1-2 白色 丝状 桔黄色 有轮纹 黑色 较少 6 曲2-2-2 白色 有轮纹 丝状 黑黄相间 有轮纹 黑色 丰富 7 曲2-1-2 黑白相间 有轮纹 絮状 黑黄相间 有轮纹 黑色 丰富 8 曲5-2-1 黑白相间 有轮纹 丝状 黑黄相间 黑色 丰富 9 曲3-1-1 黑白相间 有轮纹 丝状 黑黄相间 有轮纹 黑色 丰富 表2 9种菌株在PDA平板上的形态特征 A、菌株在PDA平板上的正面形态 B、菌株在PDA平板上的背面形态 图1 菌株在PDA平板上的形态 序号 采样地点 孢子形状 孢子颜色 孢子长（um） 孢子宽（um） 1 保山 孢子很小椭圆形 近无色，成堆时绿色 1.64～2.30 0.84～1.38 2 曲靖 纺锤形、长椭圆形或卵形 无色 长：9～14 2.5～4 3、8、9 曲靖 棒状中间4色胞同色，有尾和须。 黑褐色 本长：11.83～15.11 须长：5.43～9.84 尾长：2.02～4.93 2.30～3.63 4 曲靖 长卵形或倒棍棒形 榄褐色 孢子痕长：14～48 孢子长：33～147 孢子痕宽：6～13； 孢子宽：9～33 5 曲靖 镰刀形或梭性 无色 9.55～15.19 1.89～2.69 6 曲靖 长卵形、椭圆形或纺锤形 深蓝色或深紫色 16～25 4.5～6 7 曲靖 小型孢子椭圆形或卵形，大孢子椭圆形至长卵形 无色 小孢型子5.3～10.5 大型孢子7.5～17 小型孢子2.8～5 大型孢子2.5～5.5 表3 桑树病害孢子形态 观察结果表明（表3和图2）1号菌株初步鉴定为亚木霉（Trichoderma koningii） ， 2号菌株初步鉴定为桑幹枯病（Phomopsis sp） ,3、8、9号菌株初步鉴定为拟盘多毛孢（Pestalotiopsis） ，5号菌株初步鉴定为禾赤霉菌（Gibberella zeae），4号菌株初步鉴定为甘蓝长尾交链孢霉（Alternaria brassicae） ，5号菌株初步鉴定为禾赤霉菌（Gibberella zeae） ，6号菌株初步鉴定为桑牙枯病（Fusarium cerealis），7号菌株初步鉴定为蔓枯病菌（Didymella bryoniae） 。 A、3号菌株孢子形态 B、1号菌株孢子形态 C、5号菌株孢子形态 形态学鉴定结果 图2 桑树病害孢子形态 分子鉴定结果： 本试验中分离的9个菌株与从GeneBank比对结果表明， 保2-2、曲4-1-1、曲6-2-1、曲5-1-1、曲5-1-2、曲2-2-2、曲2-1-2、曲5-2-1、曲3-1-1号菌株是亚木霉 、桑干枯菌 、细极链格孢 、甘蓝长尾交链孢霉 、禾赤霉菌 、桑牙枯菌 、蔓枯病菌 、细极链格孢 、天竺葵链格孢 。 菌种 Accession Max ident Description Genebank比对结果 保2-2 AF218790.1 99% Trichoderma koningii 亚木霉 曲4-1-1 AB302247.1 99% Phomopsis sp 桑干枯菌 曲6-2-1 HM467832.1 99% Alternaria tenuissima 细极链格孢 曲5-1-1 JF439449.1 99% Alternar