一种真菌漆酶的克隆与序列分析.pdfVIP

一 种 真 菌 漆 酶 的 克 隆 与 序 列 分 析 马文寅1， 蔡宇杰⋯， 廖祥儒 ， 胡艳1， 李枝玲2 ， 张大兵 ( 1．江南大学T业生物技术教育部重点实验室．江苏无锡2 14 122 ；2 ．江苏汉邦科技有限公司．江苏淮安22300 1) 摘要：比较了几种不同真菌DNA提取方法对血红密孔茵基因组的提取的影响，根据GenBank 中真菌漆酶氨基酸保守序列设计的简并引物，以血红密孔菌基 因组总DNA为模板，扩增到一条 长度为10 84 bp 的DNA片段 。通过BLAST比对，其基因序列与密孔茵属同源性最高，为99 ％， 氨基酸同源性为88 ％，说明扩增的片段确为密孔茵漆酶基因。 关键词：漆酶；克隆；序列分析；血红密孔茵 中图分类号：Q 8 14文献标识码：A文章编号：1673—1689( 20 12) 0 1一040—07 Cl oni ng an Sequenci ng Anal ys i s of a Laccas e Gene f r om Fungus MA肌咒一yi nl 。 CA工Yu-j i e “，LI AO Xi a ng—r ul ， HUYa nl ， LJ ZH，一l i ng 2， ZHANGDa —bi n 92 ( 1．Key Lab or a t or y of I n ust r i al Bi ot ec hn ol ogy，Mi n i s t r y of E u ca t i on ，Ji an gn an Uni ver si t y，Wuxi 2 14 122 ，Chi na , 2 ．Hanbon Sci en ceTechno l ogy Co ．Lt 。Huai an 223001，Chi na) Ab st r a ct ：Ef l ee t of sev er al i f f er en t me t ho s on t he DNA ext r a ct i on f r om Pycnopor us s an— gui neus wer e compa r e i n t hi s s t u y ．Degener at e pr i mer s wer e es i gne a cc or i ng t o t he fungal l ac case c on er vat i on s equenc es whi c h was r eg i st er e on GenBank ，．A 1 084 bp l ac case gene f r agment was amp l i f i e by us i n g genomi c DNAf r om Pyc nopor us s angui neus as t e mp l a t e ．Ac— c or i ng t o t he BLAST r es ul t s ，we f oun t hat t he s equenc e pr e s ent e a v er y hi gh ma t ch wi t h t he l ac case gene f r om Pycnop or us an s har e con si er ab l e homol ogy of above 99 ％．The a l i gn — me nt of ami n o ac i s s har e cons i er a bl e homol ogy of above 88 ％．Ther ef or e ，t he genomi c DNAs houl b e Py cn op or u s ． Key wor s ：l ac c as e，cl oni ng ，se quenc e anal ys i s ，Pycnoporus s angui neus 漆酶( Laccas e ，EC 1 1．0 ．3 ．2) 是一种多酚氧 物漂白，芳香化合物脱毒，环境垃圾处理等[ 4] ，以及 化酶，最早是从漆树中发现的[ 1] 。漆酶广泛存在于