探针的标记及产物的纯化.pptVIP

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  • 2018-01-03 发布于湖北
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探针的标记及产物的纯化

三种标记方法??? PCR标记 反转录标记 随机引物标记 两种纯化方法 Microcon 30 filter法 直接沉淀法 PCR标记 1 将2μg待标记的样品DNA加入到 PCR 反应管中 2 在冰上,加: ?????反应缓冲液??????????????? 5μl ??????25 mM MgCl 2???????????????????? 4μl ??????10 mM dATP–dGTP–dTTP????? 1μl ?????? 1 mM dTTP????????????????????? ? 1μl ??????10 μM 引物混合物????????? 1μl ???????双蒸水?????????????????????? 36.5μl ???????0.1 mM CY5-dUTP???????????????? 1μl ???????Taq DNA 聚合酶??????????????? 0.5μl???? PCR标记 3. 混匀上述试剂后,将PCR反应管置于PCR仪中,按下列程序进行PCR反应: ???????????? ① 95℃??????????????

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