短双歧杆菌!-d-半乳糖苷酶基因aga1在大肠杆菌中的-微生物学报.pdfVIP

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2018-01-22 发布于天津
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短双歧杆菌!-d-半乳糖苷酶基因aga1在大肠杆菌中的-微生物学报

卷期 ! # 微生物学报 %’ (! - (# 年月 #$$ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ )*+,’ #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 短双歧杆菌 !!半乳糖苷酶基因$+$ # 在大肠杆菌中的高效表达 ! 陆宇赵晗王勤鹏刘巍峰肖敏（山东大学微生物技术国家重点实验室济南 #$/$$ ）摘要：短双歧杆菌（）半乳糖苷酶基因（）被克隆到大肠杆菌温度诱导表达质粒 !# $%’()*+,- +*.* #$. 5E5 ’/’ / ! 中，构建重组质粒，转入大肠杆菌进行温度诱导表达，得到的重组酶在大肠杆菌、 *F%##$ *F%7G7/ )G7/ EH!EH/$F 和中的比活分别为、和，均高于短双歧杆菌半乳糖苷酶的比活。重组质 FI#/ #1 J$1 /A J!! /. J1KL:G 5E5 /J04KL:G ! 粒*F%7G7/ 在 0 ( (%1 FI#/ 中稳定性较好。重组酶)G7/ 蛋白亚基分子量约40ME，最适反应温度为!N ，酶在!$N 以下稳定，仅剩余约的酶活性，时酶全部失活；最适反应为，酶在范围内稳 4$N O 0$N *H ! J$ P ! J! *H . J4 P 4 J$ 定；酶对硝基苯酚半乳糖苷的，（· ），对蜜二糖的， 2 5 5 5 3 Q /J!.::’L I 4 Q . J0/ :’L I :,; 3 Q #4/::’L I 4 Q ! : :78 : :78 4. J4A （· ）；酶在蜜二糖、棉子糖水解体系中不显示转糖基活性。结果说明与已经报道的一种短双歧 :’L I :,; )G7/ 杆菌的半乳糖苷酶不同，是新发现的一种短双歧杆菌的半乳糖苷酶。 5E5 5E5 ! ! 关键词：双歧杆菌，半乳糖苷酶，温度诱导表达 5E5 ! 中图分类号：文献标识码：文章编号：（） R014 ) $$$/54#$A #