椪柑愈伤组织的遗传转化及转化体的再生研究.pdfVIP

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2018-01-03 发布于广东
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椪柑愈伤组织的遗传转化及转化体的再生研究.pdf

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72 园艺学进展(第七辑槿柑愈伤组织的遗传转化及转化体的再生郑启发“2胡桂兵“ 陈大成1黄自然3林顺权1 ResearchandEducation (1华南农业大学园艺生物技术研究所，广东广州510642；2Citrus Center， of Florida—IFAS，LakeAlfred，FL33850，USA； University 3华南农业大学动物科学学院，广东广州51Q642) 摘要：在研究促进槛柑愈伤组织的增殖、体细胞胚发生和植株再生条件的同时，通过农杆菌感染金刚砂涡旋创伤的碰柑愈伤组织，将API和AP—BD基因转人碰柑细胞并经过选择 I)的同一菌株LBA4404的再生培养获得了转化植株。采用含不同目的基因(AP—DB和AP 混合菌液感染基因受体材料桠柑的愈伤组织。通过金刚砂创伤处理比未创伤处理的均获得了较多的KanR胚状体；金刚砂创伤对碰柑转化效果的影响达到了显著差异的水平。经过PCR检测的138个转化体样品中，含有AP—D基因、AP—B基因和API基因的样品，分别占6．5％、 blot的检测结占1．4％；同时含有AP—D、AP—B基因的只有1个样品，占0．7％。Southern 果显示基因在植物中是以单拷贝的形式整合。．关键词：碰柑；农杆菌介导法；基因枪；遗传转化；抗菌肽B(AP—B)基因；抗菌肽D (AP—D)基囚；APETALAI(API)基因 ofsomatic and Abstract；Baseon ofcallus，inductionembryo multiplication plantregener- AP AP—BD ationinPonkanmandarin(CitrusreticulataBlancocv．‘Ponkan’)，theand I weretransformedintothecalluswounded medicated by genes byAgrobacteriumtumefaciens callus carborundum，transformicwereobtainedfromthe selection．A．tu一 plantlets through strainLBA4404 or 1wasusedinthistransformation Ⅲ如ciens harboringpCDB—lIp208～AP containsAP containsbothAP—DandAP—B I I research．pCDB—lI gene，a