第八章 生物氧化2修改.ppt

The ATP synthase comprises a proton channel (Fo) and a ATPase (F1) 要点： 1．ATP酶利用质子动力势，产生构象的改变，改变与底物的亲和力，催化ADP与Pi形成ATP。 2. F1具有三个催化位点，但在特定的时间，三个催化位点的构象不同、因而与核苷酸的亲和力不同。 在L构象（loose），ADP、 Pi与酶疏松结合在一起； 在T（tight)构象底物与酶紧密结合在一起，在这种情况下可将两者加合在一 起; 在O(open)构象ATP与酶的亲和力很低，被释放出去。 Structure of the F1 complex Rod-shaped g subunit (shaft, 旋转轴) Crystal structure of bovine F1 Each b subunit of ATP synthase can assume three different conformations The g subunit of F1 The c subunits of Fo a b 3．质子通过F0时，引起c亚基构成的环旋转，从而带动γ亚基旋转，由于γ亚基的端部是高度不对称的，它的旋转引起β亚基3个催化位点构象的周期性变化（L、T、O），不断将ADP和Pi加合在一起，形成ATP。 Binding-change model for ATP synthase b-ATP b-ADP b-empty Rotation of the g subunit and the ring of c subunits in the F0F1 complex was observed by in vitro studies using fluorescence microscopy 三、氧化磷酸化的作用机制 1.ATP生成部位： 三个部位由三个酶复合体催化： 部位Ⅰ：NADH与CoQ之间，NADH脱氢酶。 部位Ⅱ：CoQ与CytC之间，CytC还原酶。 部位Ⅲ：Cytaa3与O2之间，CytC氧化酶。 表8-4 离体线粒体实验中测得一些底物的P/O值 底物 呼吸链的组成 P/O值 生成ATP数 1. β-羟丁酸 NAD+→FMN→CoQ→Cyt→O2 2.4～2.8 3 琥珀酸 FAD→CoQ→Cyt→O2 1.7 2 抗坏血酸 Cytc→Cytaa3→O2 0.88 1 Cytc(Fe2+) Cytaa3→O2 0.61～0.68 1 2. 3. 4. 比较1、2，第一个偶联部位 NAD+ → CoQ 之间 比较2、3，第二个偶联部位 CoQ → Cytc 之间 比较3、4，第三个偶联部位 Cytaa3 → O2 之间 ATP产生的部位都是有大的电位差变化的地方 例如，NADH呼吸链生成ATP的三个部位是：E0值在此三个部位有大的“跳动”，都在0.2伏以上。 表8-5 呼吸链电子传递时△G0′的变化 部位 △E0′（V） △G0′ (kJ/mol) NADH - CoQ 0.36 -69.5 CoQ - Cyt c 0.19 -36.7 Cyt aa3 - O2 0.58 -112.0 计算各阶段释放的自由能 ADP+Pi ATP △G0′= 30.5 kJ/mol △G0′=-n F△E0′ △G0′0 放能 △G0′0 吸能 △G0′=0 无能变化 形成三个ATP耗能 91.5 KJ/mol， 能量利用率达41% 呼吸链中电子传递时自由能的下降与ATP的生成 FADH2 2e- NADH ?G?’-69.5kJ/mol ?G? -36.7 kJ/mol ?G? -112kJ/moL 2、能量偶联假说： 氧化与磷酸化作用如何耦联尚不够清楚，目前主要有三个学说： 1953年 Edward Slater:化学耦联学说（chemical coupling） 1964年 Paul Boyer:结构耦联学说（Conformational coupling） 1961年 Peter Mitchell:化学渗透学说(The chemiosmotic theory) 。 化 学 渗 透 学 说 要 点 1