15-16细胞周期-36.ppt

* * MPF 活性周期 Cdk1激酶活性首先依赖于cyclin B含量的积累。 cyclin B的含量达到一定值并与Cdk1蛋白结合，同时在其他一些因素的调节下， 在M期逐渐表现出最大激酶活性。 * * MPF在M期的调节作用：启动细胞从G2期进入M期的相关事件。（p202） Cdk1 激活APC RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 核仁解体 染色体凝集 核膜破裂 纺锤体形成 * * M期cyclin的降解盒(破坏框)与泛素化降解 （蛋白酶体） （后期启动复合物） 二、细胞周期的清道夫—— 周期性蛋白质的泛素化降解 多聚泛素链 （泛素） * * 泛素（Ubiquitin，Ub）是一种高度保守的小蛋白（含76个氨基酸），普遍存在于真核细胞内。如人类和酵母的泛素有96%的相似性。泛素共价地结合于底物蛋白质的赖氨酸残基，被泛素标记的蛋白质将被蛋白酶体特异性地识别并迅速降解。 E1：泛素激活酶 E2：泛素结合酶 E3：泛素连接酶，泛素化的关键酶，包括APC、SCF等。 APC(后期启动复合物)的活性变化是分裂中期/后期转化的关键问题。 SCF(蛋白酶解复合体) (A) SCF介导CKI(cdk抑制蛋白)的降解； (B) APC介导M-cyclin的降解。 细胞周期运转到分裂中期后，M期周期蛋白A和B迅速降解， Cdk1激酶活性丧失，细胞周期便从M期中期向后期转化。 S期周期蛋白D和E降解后，推动细胞进入G2期。 * * 泛素是蛋白质降解标签。泛素化蛋白降解机制是细胞内短寿命蛋白和一些异常蛋白降解的普遍途径，是非溶酶体的蛋白质分解系统。 * * 蛋白酶体：26S，一种巨型蛋白质复合物，特异识别泛素化的蛋白质并降解之，蛋白质被切割为约7-8个氨基酸长的肽段；这些肽段可以被进一步降解为单个氨基酸分子，然后被用于合成新的蛋白质。 2004年诺贝尔化学奖的获奖主题是泛素调节的蛋白质酶解过程的发现。三位获奖者为阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科和欧文·罗斯。 * * 蒲淑萍 基础医学院 细胞生物学及遗传学教研室 细胞周期(cell cycle) * * ★细胞的最终命运： 细胞分裂(cell division)及生长(相关物质准备和积累)→细胞增殖(cell proliferation)，受到严密的调控机制所监控 细胞死亡(cell death) * * 受精卵及卵裂 * * Dividing Muscle Myoblast (primative muscle cell) (SEM x8,000) * * 示植物细胞有丝分裂 * * * * 标准的细胞周期：从G1期开始，历经S、G2，到M期结束。 * * ●细胞周期 ●细胞周期时间(Tc) G1(DNA合成前期) 变异范围大(0h~数年) 间期 S (DNA合成期) 8~30h G2 (DNA合成后期) 0h;1~5h 分裂期(M) 0.5~1h 第一节 细胞周期的基本概念 细胞周期时间因细胞类型、状态和环境而异。 * * ●细胞的增殖特性 1）连续增殖细胞（周期性细胞）：能够增殖，不断进入周期完成分裂。 2）暂不增殖细胞（休眠细胞，G0细胞）：长期停留在G1晚期(G0期)而不越过限制点，未丧失分裂能力，在适当条件下可恢复到增殖状态。 3）永不增殖细胞（终末分化细胞）：始终停留在G1期 ，失去增殖能力直到衰老死亡。 (p189) * * 执行某种生物学功能，或进行细胞分化，或走向死亡；或回到细胞周期。 (限制点，R点) (p204) * * ●细胞周期研究方法 细胞周期模型 细胞周期同步化 如细胞分裂收获法 流式细胞技术 * * by flow cytometer microscopy (包括G0) * * ●细胞周期检验点(checkpoint) ★ G1∕S之DNA损伤检验点，限制点，R点 ★ S期之DNA复制检验点 ★ G2∕M之DNA损伤检查点 ★ M期中期∕后期之纺锤体组装检验点 (p204) * * DNA复制是否完成？ damage S期检验点 * * 第二节 细胞周期的主要事件 一、G1期：细胞生长、分裂决定、复制准备 1. RNA、蛋白质(如与DNA复制有关的酶及与G1期向S期转变相关的蛋白质等)合成和代谢活动旺盛 （→细胞的第一生长期） 2. 分裂决定：越过G1期