新型快速植物基因组DNA提取试剂盒-深圳中联生物科技开发有限.DOCVIP

深圳市中联生物科技开发有限公司 ZL Biotech Corporation 地 址：深圳市南山区桃源街道留仙大道1183号南山云谷创新产业园综合服务楼506-508 电 话：0755传真：0755-8655 0193 网 址：  一般实验室使用，仅用于体外 新型快速植物基因组DNA提取试剂盒 （离心柱型） 用于快速提取植物基因组DNA 目录号：DP3111（50次） DP3112（100次） 目录号：DP3113（200次） 使用手册 2007年7月，第1版 深圳市中联生物科技开发有限公司 ZL Biotech Corporation 一、试剂盒组成、储存、稳定性 试剂盒组成 保存 50 次 100 次 200 次 （DP3111） （DP3112） （DP3113） Buffer P1 室温 30 ml 60 ml 120 ml Buffer P2 室温 7 ml 14 ml 28 ml Buffer P3 室温 50 ml 100 ml 200 ml RNase A -20℃ 200 μl 400 μl 800 μl 漂洗液 WB 室温 15 ml 25ml 25mlX2 第一次使用前按说明加指定量乙醇 洗脱缓冲液 EB 室温 15 ml 20 ml 40 ml 分离柱 A 室温 50 个 100 个 200 个 吸附柱 AC 室温 50 个 100 个 200 个 收集管（2ml） 室温 50 个 100 个 200 个 �{试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。 注意事项 1． 第一次使用前请先在 15ml 漂洗液 WB 中加入 60ml 无水乙醇，充分混匀，加入后请及 时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 2． Buffer P1、Buffer P3 低温时可�\出现析出和沉淀，可以在 37℃水浴�{分钟帮 助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 3． 避免试剂长时间�\露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及时盖 紧盖子。 -1- -6- 六、疑难解答（Trouble shooting） 出现的问题 可�\的原因 建议解决方法 DNA产量低 处理材料过量或者裂解不 使用适量的起始材料，充分研磨 完全 或者匀浆 RNA 残留 植物含量 RNA 太丰富 在步骤 3 后裂 解物中加 40μl RNase ， 也 可 以 多 加 到 80μl RNase。 未提取到 DNA 漂洗液 WB 中忘记加无水 第一次实验时，在漂洗液 WB 中 乙醇 加入指定量无水乙醇。 洗脱下来的 DNA 溶 漂洗次数不够 步骤 7 完成后，加 500μlWB 或 液带颜色或者膜上 无水乙醇再漂洗一遍 有明显的色素残留 起始材料太多过量 减少起始处理材料，不要过量 洗脱下来的DNA产量 离心柱残留有较多乙醇或 确保做了步骤 10，否则残留乙醇 低 者底部不慎重沾有乙醇 会影响洗脱效率。 使用了水或者其它非最佳 仔细阅读步骤 10 和只使用洗脱缓 液体代替洗脱缓冲液 冲液 EB 洗脱。 A260 吸光值异常偏高 一些硅基质膜成分一起洗 将洗脱的基因组 DNA 溶液 13， 脱下来，干扰了吸光值 000rpm 再离心一分钟，小心取上 清使用。 DNA下游酶切不�\ 一些硅基质膜成分一起洗 将洗脱的基因组 DNA 溶液 13， 切开或者酶切不完 脱下来，�}制了酶切反应 000rpm 再离心一分钟，小心取上 全 清使用。 离心柱残留有较多乙醇或 确保做了步骤 10，然后空气中晾 者底部不慎沾有乙醇�}制 �{分钟，让残留乙醇挥发。 了酶切反应 -5-  二、原理简介 改进的 CTAB 植物 DNA 抽提液（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除 成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，氯仿抽提后通过离心清除多糖、 多酚和蛋白质，上清加入异丙醇离心沉淀基因组 DNA，进一步去除其它各种 杂质，然后基因组 DNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心步骤, 进一步将多糖，多酚和细胞代谢物， 蛋白等杂质去除， 最后低盐的洗脱缓冲液将基因组 DNA 从硅基质膜上洗脱。 三、试剂盒特点 1． 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附 量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2． 不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂。 3． 快速，简捷，单个样品操作一般可在 1 小时内完成。 4． 数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型 的比值达 1.7～1.9，长度可达 30Kb-50kb，可直接用于 PCR， Southern-blot 和各种酶切反应。 四、注意事项（实验前必