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模块一 紫外-可见分光光度法 清远职业技术学院 生物制药技术专业 子项目2：用紫外分光光度计对维生素C的含量的进行测定 讨论 有色溶液对光选择性吸收，那么一些无色的有机溶液是否对光没有吸收呢? 哪些物质对紫外线有吸收？请举例 思考 1、庚烷、环己烷等烷烃在200-400nm内有无吸收？ 2、甲苯、丁二烯在200-400nm内有无吸收？ 3、乙醛、丙酮、乙酸乙酯在200-400nm内有无吸收？ 4、如果环己烷中含有少量的杂质苯，其紫外吸收曲线会怎样? 请大家归纳总结可见分光光度法和紫外分光光度法的联系和区别。(定义、条件、仪器、应用) * * 知识目标 教学目标 能力目标 熟悉紫外吸收光谱定义及产生、常用术语、常见有机化合物紫外吸收光谱、定性鉴定方法；掌握紫外光谱定量分析的原理和方法，干扰的消除。 绘制紫外吸收曲线；能采用紫外吸收光谱对未知试样定性鉴定，推测化合物的分子结构；能对工作波长的选择;能对数据进行处理,绘制工作曲线,确定未知含量。 项目5：用紫外-可见分光光度计对化妆品样品的维生素C和砷含量进行分析评价 对紫外光区有吸收的无色透明物质都可测定,能吸收紫外光的物质:具有π电子和共轭双键的化合物. 紫外分光光度法的波长范围：200nm-400nm 紫外吸收曲线绘制： 即用一束具有连续波长的紫外光照射一定浓度的样品溶液，分别测量不同波长下溶液的吸光度，即得到该化合物的紫外吸收曲线。 茴香醛紫外吸收曲线 紫外吸收曲线绘制 问题:如何绘制苯的吸收曲线? 紫外光谱产生的原因及其特点 产生原因：处于基态的电子因为吸收能量，电子在不同轨道间 发生跃迁 分析特点： 1、可用来定性鉴定和结构分析 2、不需要加显色剂，测量简单方便 3、灵敏度高，准确度 σ→σ*＞n→σ*＞π→π* ＞n→π* 电子跃迁和吸收的光的波长有何关系？？ 紫外光谱常用术语 生色团和助色团：产生特征吸收带的具有一个或多个不饱和键 和未共用电子对的基团。 红移和蓝移：由于取代基或溶剂的影响造成化合物结构变化，使吸收峰向长波和短波方向移动的现象。 增色效应和减色效应：由于有机化合物的结构变化使吸收峰摩尔吸光系数增加的现象。 溶剂效应：由于溶剂的极性不同引起某些化合物的吸收峰的波长、强度和形状产生变化的现象。 吸收带的类型 K吸收带:π→π＊跃迁,吸收波长λ217-280nm R吸收带:n→π＊跃迁,吸收波长λ>270nm B吸收带: 苯环震动和π→π＊跃迁,吸收波长λ230-270nm E吸收带: →π＊跃迁,芳香族化合物的特征吸收带,吸收波长λ204nm 乙酰苯的紫外吸收光谱 绘制吸收曲线,选择最大波长；合适的参比液 有色溶液；显色剂；控制PH; 绘制吸收曲线,选择最大波长 减小干扰;合适的参比液 条件 200-400nm,氘灯,石英吸收池 400-780nm,钨灯,玻璃吸收池 仪器 基于物质对紫外光的吸收而对 物质进行定性和定量分析的一 类方法 基于物质对可见光的吸收而对 物质进行定性和定量分析的一 类方法 定义 紫外分光光度法 可见分光光度法 紫外吸收光谱的应用 1、定性鉴定 未知样品采用比较光谱法，标准物对照，或者标准图谱对照。 2、推测结构 推定化合物的共扼关系、部分骨架；区分化合物的构型；互变异构体的鉴别； 3、化合物纯度的检测 化合物在紫外区没有明显的吸收峰，而杂质在紫外区有较强的吸收，就可以紫外吸收曲线检测出该化合物所含的杂质。 如乙醇中杂质苯测定检查 了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。 紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律是： ⑴若在200～750nm波长范围内无吸收峰，则可能是直链烷烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双键的烯烃等。 ⑵若在270～350nm波长范围内有低强度吸收峰(ε＝10～100L·mol-1·cm-1),（n→π跃迁），则可能含有一个简单非共轭且含有n电子的生色团，如羰基。 有机紫外吸收光谱的解析 ⑶若在2５0～300nm波长范围内有中等强度的吸收峰则可能含苯环。 ⑷若在210～250nm波长范围内有强吸收峰，则可能含有2个共轭双键；若在260～300nm波长范围内有强吸收峰，则说明该有机物含有3个或3个以上共轭双键。 ⑸若该有机物的吸收峰延伸至可见光区，则该有机物可能是长链共轭或稠环化合物。