低毒高效的SDS-PAGE考马斯亮蓝染色方法比较.pdf

技 术 通 LETTER H 0LOGY …Vo1．2…·2Nro．2一·M一一ar．，，2…01l1 26l TT S IN BIOTECHN doi：10．3969／j．issn．1009—0002．2011．01．027 技术方法 低毒高效的SDS—PAGE考马斯亮蓝染色方法比较 李慧，吴恩应 ，张运佳 深圳市卫武光明生物制品有限公司，广东 深圳 518107 [摘要] 目的：比较SDS—PAGE的4种考马斯亮蓝染色方法。方法 ：以牛血清 白蛋 白为材料进行 SDS—PAGEI，分别 比 较考马斯亮蓝G一250(CBBG250)盐酸法、CBBG-．-250一A12(SO)3法、Bio—Rad公司的Bio—Sa．Jfe染色液及传统法等4 种染色方法的灵敏度和操作性，并将上述 4种染色方法应用于蛋 白Markers检测。结果：CBBG一250AL(SO)，法和 Bjo—Safe法的检测灵敏度都可达 19．2ng，而CBBG一250盐酸法和传统法的检测灵敏度则为 28．9ng。结论 ：CBBG一 250盐酸法可作为快速、低毒、高效的染色方法 ，CBB一-A1：(so)，法则可用于灵敏度要求较高的检测。 [关键词] SDS—PAGE；染色 ；脱色 ；低毒 ；高效；考马斯亮蓝 [中图分类号] Q503 [文献标识码] A [文章编号] 1009—0002(2011)02-0261-03 Low Toxicity and High Effi ciency Staining M ethodswith Coomassie BrilliantBluein SDS—PAGE LIHui． En-Ying,ZHANG Yun．一Jia Shenzhen Weiwu Guangming BiologicalProductsCo．，Ltd．，Shenzhen 518107，China [Abstract] Ob1jective：TocomparefourkindsofstainingmethodswithCoomassiebrilhantblue(CBff)inSDS— PAGEI．M ethotis：Wecompared hte sensitivity and efficiency among CBB G一250 wiht hydrochloric acid．．CBB G一 250 wiht aluminum SUflate， Bio-．-Safe ofBio～．Rad and thetraditionaImethod， in which BSA wasrtln． Then．， hte fourmethodswere applied to hte marke~rsdetection．Results：Theresultsdemonstrated htatCBB G一-250 with alu— minum sulfateandBio一．Safeexhibithighersensiticity(19．2ng1thanCBBG250withhydrochloricacidandthetra— ditionalmethodf28．9ng)．Conclusion：TheobservationssupportthathteCBBG-一-250withhydrochloricacidiSan environmentfriendly,， rapid and highly effective staining method． while the CBB G一250 wiht aluminum suflate iS probablymoresuitableforhigh sensitivitydetermination． [Keywords] SDS；staininganddestaining；lowtoxicity；highefficiency；Coomassiebilhantblue 十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶 电泳 (SDS— 1 材料与方法 PAGE)是当前最常用的检测方法之一 ，它不仅可以 检测蛋 白质的相对分