南美白对虾TCTP基因表达分析.pdf

第 31卷第 2期 泉州师范学院学报 VoI．31NO．2 2013年 4月 JournalofQuanzhouNormalUniversity Apr．2013 南美白对虾 TCTP基因表达分析 黄华根 ，沈文英 ，吴文林 (泉州师范学院 化学与生命科学学院，福建 泉州 362000) 摘 要 ：以~3-actin为 内参基 因，通过荧光 PCR方法 ，分析 了翻译调控肿瘤蛋 白(TCTP)基 因在南美 白对 虾不同组织 中的表达情况 ，结果表明，TCTP基因在对虾的各种组织 中均有表达 ，但在肌肉中表达量最高 ，而 心脏中的表达最低． 关键词 ：南美 白对虾 ；TCTP；表达 中图分类号 ：Q575 ．12 文献标识码 ：A 文章编号：1009—8224(2013)02—0075—04 翻译调控肿瘤蛋 白(translationallycontrolledtumorprotein，TCTP)是一种高度保守 ，分子量大约 为19ku、在真核生物中广泛存在的蛋 白质 ，在酵母菌 ，植物 ，动物 中均有发现 ．研究发现 TCTP参与 多种生物学过程 ，如细胞生长L5]、细胞周期 ]、抗凋亡作用 ]，同时，TCTP也参与细胞内外的应激反应 ， 如钙胁迫 ¨8]、饥饿C93、热激_10_和重金属胁迫口．还有研究发现 TCTP参与防御病原体如病毒和细菌的感 染 ，当用哈维氏弧菌 (Yibroharveyi)感染斑节对虾 (Penaeusmonodon)时 ，TCTP基 因的转录水平上 调[】，若用对虾 白斑病毒 WSSV感染 日本对虾 ，其 TCTP基因的表达 也有上升 ，帘蛤 (Venerupis philippinarum)受到感染6～12h后 ，其体 内TCTP的表达出现下降 ，然后上升_1． 南美 白对虾 (Litopenaeusvannamei)，又称凡纳滨对虾，原产于南美洲 ，如今 已是我 国和世界第一 大养殖对虾种类 ，对满足人们优质蛋 白食 品需求起到 了重要作用．我国凡纳滨对虾养殖年产量 130万 吨，占全国养殖对虾总产量近 90％，年产值逾 500亿元．中国凡纳滨对虾养殖产业的跨越式发展 ，也深刻 改变 了世界对虾养殖生产格局．凡纳滨对虾现 已成为世界第一大养殖虾种，占世界养殖虾 总产量 的 70 ，其中，中国的养殖产量超过 5O ．但随着养殖密度的增加和养殖水质的下降，凡纳滨对虾病害频繁 的出现 ，特别是 白斑综合症病毒 (WSSV)的爆发使凡纳滨对虾养殖造成重大经济损失_1．对虾养殖业 的可持续发展与对虾病害的控制密切相关 ，而病害控制除了病原以外，宿主本身的抗病能力是一个重要 因素．因此 ，寻找和发现对虾体 内的免疫因子和免疫蛋白，探究对虾的免疫机制 ，成为对虾疾病防控 的重 要一环． 本文研究南美 白对虾 TCTP基 因在南美 白对虾不 同组织在转录水平上的分布情况 ，为研究 TCTP 与 WSSV病毒感染 的相关性打下基础，希望为对虾的免疫研究提供科学依据． 1 材料与方法 1．1 材 料 1．1．1 试验用动物 试验用原始病毒提取 自厦门同安对虾养殖场收集的感染 阳性对虾 ，由本实验室保 存．南美 白对虾购于泉州菜市场． 1．1．2 主要试剂 总 RNA提取试剂盒 TRIzol为 Invitrogen公司产品．M—MLVRT反转录试剂盒 、 SYBRPremixEXTaqlI、TaqDNA 聚合酶购买 自TaKaRa(大连)有限公司．DNaseI购 自Ferments公 司．引物由上海 Sangon公司合成．其他试剂为国产分析纯． 收稿 日期 ：2013—01—18 通信作者 ：吴文林 (1968一)，男 ，福建漳州人 ，教授 ，博士 ，从事海洋生物分子研究 ，E—mail：wenliw@hotmail．corn 基金项 目：国家 自然科学基金 ；福建省教育厅项 目(JK2009043) 76 泉州师范学院学报 2013年 4月 1．2 方法