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! 第一章 平面色谱法概述 %!$ 第一章 平面色谱法概述 第一节 平面色谱法的分类及原理 平面色谱法与柱色谱法的原理是完全相同的，只是前者为开放式的离线操作，而后者为封 闭式的在线操作。平面色谱法的分类及简单原理如下。 一、纸色谱法 纸色谱法的载体是滤纸，制造滤纸的原料为纤维素，纤维素为惰性物质，其分子中具有很 多羟基，有较强的亲水性，能吸收约 左右的水分，其中约有 的水分与纤维素上的羟基 !! # 结合形成液液分配色谱中的固定相，待分离的物质点在滤纸条的一端后，将其悬挂在密闭的展 开室内，待纸为展开剂蒸气饱和后将点样一端浸入展开剂中，当展开剂借毛细作用流向另一端 时，被分离物质因其理化性质的不同，在固定相及流动相中分配系数不同而得到分离。虽然滤 纸纤维对某些化合物有时也存在吸附作用及呈现弱离子交换的作用，但在纸色谱法中起主要 分离作用的是被分离物质在两相中的分配，因此纸色谱法是属于液液分配色谱法。众所周知， 固定相的极性大于流动相的极性时，属正相分配色谱法；反之，则为反相分配色谱法。一般来 讲纸色谱为正相分配色谱法，只有在用低极性的液体如烃类（石蜡油、十一烷、硅油等）处理滤 纸后作为固定相，再以极性大的溶剂为流动相时，才为反相分配纸色谱法。 二、薄层色谱法 将固定相于玻璃等载板上涂布成均匀的薄层，将被分离物质点在薄层的一端，置展开室 中，展开剂（流动相）借毛细作用从薄层点样的一端展开到另一端，在此过程中不同物质可以得 到分离，分离的原理随所用的固定相不同而异，基本上与柱色谱相同，也可分为吸附薄层法、分 配薄层法、离子交换薄层法以及凝胶薄层法等。 三、薄层电泳法 电泳法是指带电荷的被分离物质（蛋白质、核苷酸、多肽、糖类等）在纸、醋酸纤维素、琼脂 糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶等惰性支持介质上，向与其相反的电极方向以不同速度泳动（或迁 ! !()( 第七篇 平面色谱方法及应用 移）而得到分离，然后对组分进行定性或定量（洗脱法或扫描法）。纸电泳及聚丙烯酰胺凝胶平 板电泳等均属于平面色谱范围，但由于电泳及色谱的驱动力来源、仪器设备及测定对象与纸色 谱法及薄层色谱法有较大差别，故不在本书内介绍。 第二节 平面色谱法的技术参数 平面色谱与柱色谱的原理基本相同，但两法的操作方法不同，故技术参数也不完全相同， 现将平面色谱法（纸色谱法及薄层色谱法）中的主要技术参数介绍如下。 一、保留值 保留值是组分在色谱体系中的保留行为，反映组分与固定相作用力的大小，是色谱过程热 力学特性的参数，有如下几种表示方式。 ! 比移值 比移值（ ）是溶质移动距离与流动相移动距离之比，是平面色谱的基本定性参数［图 !# $ % （）］。 ! % ! 图$ % ! % ! 纸或薄层色谱示意图 为展开后的平面色谱示意图， 值以下式表示，见图 （）。 !# $ % ! % ! 原点中心至斑点中点的距离 !# ’ # ’ 原点中心至溶剂前沿的距离 因此，当 值为 时，表示组分留在原点未被展开，当 值为 时，表示组分随展开剂至 ! ( ! ! ! 第一章 平面色谱法概述 $($ 前沿，即组分不被固定相吸附，所以 值只能在