AQP1真核表达载体的构建及其在FRT细胞的表达精选.pdfVIP

第19卷第4期 激光生物学报 V01．19Nm4 2010年8月 ACTALASERBlOLOGYSINICA Aug．2010 1 doi：10．3969／j．issn．1007-7146．2010．04．01 AQPl真核表达载体的构建及其在FRT细胞的表达 张引红1，刘田福1，冯学超2，苏惟恒2，麻彤辉2 (1．山西医科大学实验动物中心，山西太原030001；2．东北师范大学膜通道实验室，吉林长春130024) 摘 要：目的：构建小鼠AQPI基因真核表达质粒并观察其在FRT细胞中的表达。方法：采用RT．PCR方法从 载体pCAGGS，构建小鼠AQPI的真核表达质粒，脂质体转染FRT细胞进行表达。结果：酶切和测序结果证实 AQPI真核表达质粒构建成功，经脂质体转染FRT细胞后，免疫荧光检测证明AQPI蛋自在真核细胞中成功表 表达时的功能及机制奠定了实验基础。 关键词：水通道蛋白1；载体构建；表达 中图分类号：Q786 文献标识码：A 文章编号：1007-7146(2010)04-0475-04 Constructionof Vectorfor EukaryoticExpression AQPl inFRT andIts Cells Expression Xue—cha02，SUWei．hen92，MA ZHANG托n．hon91，LIUTian-ful，FENG Tong—hui2 of Animal Medical Science，Shanxi (1．DepartmentLaboratory Univemity，Taiyuan030001，Shanxi，China； 2．MembraneChannelResearch Normal Laboratory，NorthestUniversity，Changehun130024，Jilin，China) constructarecombinantmouse vectorandobserveits inFRTcell Abstract：Objective：To AQPIeukaryotie expression in RT-PCRfrommouse tissueWaSinsertedinto vitro．Methods：AQPIgeneamplifiedby kidney eukaryoticexpression FRT vector therecombinant wastransfeetedinto cells pCAGGS．then pCAG47．S·AQPlplasmid usingLipofeetamine．Re- vectorWaS constructedandconfirmedendonucleaseandDNA eukaryotie by sequen— suits：AQPl successfully