蛋白激酶Ca对小鼠胚胎干细胞定向分化中的发育基因表达作用的研讨.pdfVIP

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·258· ScienceResearch 生命科学研究Life 蛋白激酶Ca对小鼠胚胎干细胞定向分化中的 发育基因表达作用的研究① 高前应,葛 坚,王智崇,陈慧怡,黄丹平,袁钊辉 (中山大学中山眼科中心,广东510060) [摘 要]目的:探讨蛋白激酶巴(PKC。)对小鼠胚胎干细胞(Es细胞)定向诱导分化中发育基因 4d,形成胚胎体,再分别种植于预置有盖玻片的6孔板扣直径为100mm的培养皿,经5×10-7 和14 况,并观察了PKC激活剂佛波酯(PMA)和PKC抑制剂肛鞘氨醇对它们表达的影响。结果:免疫 组化发现在诱导后第3 d d逐渐升高,至第14d恢复至正常水 PKQ,pax-6和netrin-1的mRNA表达急剧下降,第3~7 胞中的表达增强,而n鞘氨醇的作用相反,使它们的表达明显降低,而对slit-2无明显影响。结 过PKC。信号通路起作用,其机制还有待于进一步研究。 [关键词]胚胎干细胞;蛋白激酶C;细胞分化;发育基因 Effectof kinaseon protein C expression of indifferentiationof developmentalgenes mouse stemcellsintoneuron。likecellsinvitro embryonic GAO Zhao-hui Qian-ying,GE-jian,WANGZhi—chong,CHENHui-yi,HUANGDan-ping,YUAN Yat—sen Center,Sun 510060,China) (ZhongshanOphthalmic University,Guangzhou theeffectof kinasecon of [-Abstract]Objective:Tostudy protein expressiondevelopmentalgenes andnetrin一1indifferentiationofmouse stemcellsintoneuron-likecellsin pax-6.slit一2 embryonic vitroinan tOelucidatetheirrolein wereincubatedto attempt signaling.Methods:ES-BALB/c.cells fom bodiesintheESconditionedmediumfor4d.thenwere onto 6-well embryoic platedseparately culturedishescoated for 100mmdishesforRT—PCRas— immunohist

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