过氧化氢酶荧光分析法及其在海洋水生生物酶活力-中国科技论文在线.PDFVIP

中国科技论文在线 V o l. 23 高 等 学 校 化 学 学 报 　N o. 10　 2 0 0 2 年 10 月 　　 　　　　　CH EM ICAL JOU RNAL O F CH IN E SE UN IV ER S IT IE S　　　　　　　　　 1864～ 1867　 过氧化氢酶荧光分析法及其在海洋 水生生物酶活力测定中的应用 1 2 1 3 3 毛玉霞 , 郑　洪 , 郭祥群 , 陈　荣 , 郑微云 ( 1. 厦门大学化学系, 教育部现代分析科学重点实验室; 2. 海洋学系; 3. 环境科学研究中心; 厦门 36 1005) - 3 - 2 摘要　建立了一种简便、灵敏的测定过氧化氢酶的方法. 方法的线性范围为 17 ×10 ～ 17 ×10 , U mL 检测限( = 3 ) 为 85 ×10- 4 . 将其用于海洋生物样品中过氧化氢酶活力的测定, 结果令人满意. LD S 0 S U mL 关键词　过氧化氢酶测定; 喹啉; 荧光分析; F en ton 反应; 生物样品 中图分类号　 657　　　　文献标识码　 　　　　文章编号　025 10790 (2002) O A 细胞内的过氧化氢酶(CA T ) 是细胞抗氧化防御体系的一个重要组成部分, 在肝细胞和红细胞中的 活力最高. 过氧化氢酶的主要作用是催化H 2O 2 分解为H 2O 和O 2 , 使H 2O 2 不至于与O 2·- 在铁螯合物 作用下反应生成非常有害的 · . 以此减轻 对细胞的氧化损伤. 测定过氧化氢酶活性的方法主 OH H 2O 2 [ 1, 2 ] [ 1 ] [2 ] [3, 4 ] 要有测压法 、电化学方法 、滴定法 和分光光度法 等. 但这些方法均有不同程度的局限性. 本文提出一种测定CA T 的新方法. 该方法基于 F e2+ 和H 2O 2 在酸性介质中(pH～ 2 5) 经 F en ton 反应产生· , · 与喹啉经芳香羟基化反应, 羟基化喹啉在碱性介质中呈现出很强的荧光( = 360 OH OH ex , em = 440 ) , 荧光强度的增量与 2 2 的量成正比. 过氧化氢酶将 2 2 分解为 2 和