实验二 动物细胞培养液的配制与灭菌1.pptVIP

细胞生物学与细胞工程实验的总体安排（10-18周）;实验二动物细胞培养液的配制与灭菌实验类型：验证型;一、实验目的与要求;二、实验原理;;;蒸汽湿热灭菌法： 是目前最常用的一种灭菌方法。它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。 湿热灭菌法一般采用121℃，灭菌20-30min。 ;高温干热灭菌法：恒温干燥箱， 120oC～150oC的高热。果蝇培养瓶、玻璃试剂瓶等。 过滤除菌：是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌的方法。培养基等的灭菌。;化学消毒法：仅限于表面的消毒。用于不能用物理方法进行消毒的物品、空气、工作面、操作者皮肤以及某些实验器皿等。 酒精 甲醛 高锰酸钾 抗生素：用于培养液，是培养过程中预防微生物污染的重要手段以及作为微生物污染不严重时的“急救”措施 ;;三、实验仪器与材料;四、实验内容;2、 配制100ml DMEM培养基 （1） 烧杯中加适量的蒸馏水或去离子水; （2）准确称量药品DMEM 1.17g， （3）准确称量药品NaHCO3 0.37g; （4）准确称量药品谷胺酰胺0.003g； （5）准确称量药品HEPES（乙基哌嗪乙硫磺酸） 0.5958g, 依次放入烧杯;加入青霉素100IU/ml、链霉素100ug/ml. （6）人工搅拌或磁