第五章 双向琼脂扩散试验(Agar-gel double diffusion test, AGD).pptVIP

第五章 双向琼脂扩散试验 （Agar-gel double diffusion test, AGD） 一、实验目的 了解双向琼脂扩散试验的基本原理和用途，掌握其操作和实验结果观察方法。 二、原理 将抗原与特异性抗体加入含有一定电解质的琼脂凝胶平板中邻近孔内，抗原和抗体从小孔向四周自由扩散，当扩散到两者浓度比例合适的部位时，出现白色的免疫复合物沉淀线，即双向琼脂扩散试验。 二、原理 沉淀线的特征与位置与抗原抗体的特异性、浓度比例、分子大小及扩散速度相关。 如果反应材料中有两种以上的抗原抗体系统，则两孔间出现多条沉淀线。 二、原理 本次实验以血清5型APP酚水抗原检测兔抗APP免疫血清效价，其中酚水抗原以APP的荚膜和脂多糖抗原为主。本方法也是APP血清学分型的常用方法。 三、材料 1.抗原：APP酚水抗原 2.抗体：兔抗APP免疫血清 3.电解质：生理盐水（0.85%）  4.琼脂粉 5.9cm玻璃平皿、琼扩打孔器 四、操作步骤3.倒平板： 取无菌9cm玻璃培养皿1个，平放于实验台，将融化的1%琼脂溶液趁热倒培养皿中，使琼脂厚度达4mm，在室温下放置使琼脂冷却凝固。 台面要求水平 四、操作步骤4.打孔： 将打孔器扣于琼脂平板上，轻轻按下，打出呈梅花状排列的小孔，针头轻轻挑出孔中琼脂。 当心不要碰伤了孔周围的琼脂 四、操作步骤5.封底：