高分子膜载体固定化木瓜蛋白酶研究.pdfVIP

高分子膜载体固定化木瓜蛋白酶 夏葵，曾虹燕*，姜和，王亚举，廖凯波 (湘潭大学化工学院生物技术研究所 湖南 湘潭 411105) 摘要:在浸润条件下，以0.5%(v/v)戊二醛交联的高分子膜尼龙载体固定化木瓜蛋白酶。对固定化条件进行了优化，比较了 固定化酶与游离酶的酶学参数。结果表明，4 ℃、pH 6.0 条件下，将膜载体浸润于2 mg/mL 酶液中5 h，固定化酶活为 303.4U/g 。固定化酶最适反应pH 为pH6.0~7.0 ，最适反应温度为65℃。其pH 稳定性、热稳定性均比游离酶的高。 关键词:浸润，尼龙膜，木瓜蛋白酶，固定化 中图分类号 文献标识码 文章编号 Papain Immobilization by Macromolecule Membrane Carrier Xia Kui, Zeng Hong-Yan*, Jiang He, Wang Ya-Ju and Liao Kai-Bo (School of Chemical Engineering, Xiang tan University, Xiang tan 411105, Hunan) Abstract: Papain was immobilized on 0.5%(v/v) glutaraldehyde cross-linked nylon membrane by soaking method. The optimum immobilized conditions and the characteristics of free and immobilized papain were determined. The results showed that in pH 6.0, the carrier was soaked in 2 mg/mL papain solution at 4℃ for 5 h, the activity of immobilized papain 303.4U/g. The pH and temperature of optimum reaction of immobilized papain were 6.0~7.0 and 65 ℃, respectively. The pH and thermal stabilities of immobilized papain were higher than those of free papain. Keyword:soaking, nylon membrane, papain, immobilization 引 言 成为非常有前途的固定化载体，目前用PA膜做酶 木瓜蛋白酶[EC](papain)因具稳定性、 载体的报道较少[5,6] 。本文将戊二醛交联的PA膜 水解催化活性高等特点，在食品、医药、纺织等 作为酶载体，在浸润的条件下固定化木瓜蛋白酶， 生产中应用广泛[1] 。但存在价格昂贵，溶液中易 克服了传统方法所造成的酶液浪费，提高了酶的 失活结块，难以分离回收等不足，限制了其在工 活力回收率，为固定化木瓜蛋白酶的工业应用提 业上的应用。酶的固定化有利于酶的分散、回收 供数据参考。 和稳定，减少酶损耗和残余酶再次污染，其有效 1 实验部分 性和经济性在很大程度上取决于酶的固定化。膜 1.1 材料 作为固定化酶载体结合了膜的分离功能、载体功 高分子PA 膜(江西庆江化工厂生产的微孔 能和分隔功能，具有其它载体不可比拟的优点[2] 。 滤膜) 。 特别用高分子膜作为载体，可将酶的催化功能和 1.2 试剂与仪器 膜的分离功能有机结合，已成为近年来的研究热 木瓜蛋白酶，牛血清白蛋白，半胱氨酸， 点[3,4] 。尼龙(PA)膜具有良好孔径分布及机械强 酪蛋白(上海伯奥生物科技有限公司) ；所用试 度，为耐水、有机溶剂和溶胀的高分子