2015如何规范病原体检测及结果的正确解读-王锦权PPT.ppt

培养阴性≠排除感染 标本采集部位和方法 是否在使用抗菌药物时留取的标本？ 标本运送时间和方法是否正确 标本接种、培养基及培养方法的选择是否正确 是否可能是厌氧菌或其它难培养的细菌感染 细菌培养的意义 如何规范病原体检测及结果的正确解读 安徽省立医院 王锦权 内 容 病原体检测的目的 1 临床标本的正确采集 2 3 检测结果的正确解读 4 病原体检测方法 一. 病原体检测的目的 抗感染治疗 经验治疗(empirical therapy ) 推测可能的病原体及敏感性选用药物； 建立在流行病学资料之上（重要参考耐药监测资料）； 建立在概率权衡上，为保证有效概率常常以选用广谱、强效抗菌药为代价； 治疗初始的必然选择，亦用于非重症感染。 病原治疗(目标治疗，target therapy) 根据病原学诊断、药敏选择药物，是理想之选； 医院感染、重症社区感染应确保达到病原治疗； 临床微生物室起关键作用； 培养结果的准确解读。 协助明确疾病诊断 推测病程进展 制定治疗措施 观察病情 各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则 1.正确、规范采集和运送标本。 2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原，借助分子生物学的方法检测病原体核酸，结合病人的病史、症状或体征，快速作出初步诊断。 各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则 3.初步诊断同时，对病原体进行分离与鉴定。 4.检测机体对病原体的免疫产物。 5.参与临床选择抗菌药物，指导和监控微生物的治疗方案，避免 耐药菌株的产生。 二. 临床标本的正确采集 临床病原体检查的基本程序 医生、护士、病人、检验师：正确采集运送标本。 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验——报告结果。 医生：明确诊断、合理用药。 有资料显示，微生物室的误差71%是实验前因素造成的。 标本采集的基本原则 无菌、及时、按照要求、标注清晰 根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位，尽量采集病变明显部位标本。 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗菌药物使用前（如使用过抗菌药物应在申请单上注明）。 采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、立即送检。 标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。 标本送检 标本要求在30min内送检，否则影响阳性率。 烈性传染病标本需专人护送。 遵照医嘱 充分准备 严格查对 正确采集 及时送检 标本的采集和送检六原则 避免杂菌污染 不同期不同标本 用抗菌药物前 采集病变明显部位 运送注意保存 标本必须新鲜 拒收标本 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不符合。 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过长。 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 5.样本的检验项目申请不适合进行。 6.当日重复送样本（除血液培养外）。 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 8.被正常厌养菌污染的标本，要求检测。 三. 病原体检测方法 临床常见病原体检查方法 直接显微镜检 血清学诊断(查特异性抗原/抗体) 病原体核酸检测(PCR.DNA探针) 病原体的分离培养和鉴定 致病菌的检验程序 直接涂片 染色镜检 分离培养 形态特征 生化试验 血清学试验 动物实验 明确诊断 初步诊断 血清学诊断 细菌的快速鉴定 形态学检查 （常规培养或特殊培养） （凝集试验、 沉淀反应、免疫标记技术等） (微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等） 药物敏感试验 临床感染常见病原体检查 细菌形态学检查 直接观察法 染色标本镜检 革兰氏阳性球菌 革兰氏阴性杆菌 墨汁染色找 新型隐球菌 抗酸染色 阴性杆菌生长速度快于阳性球菌、念珠菌！ 常用的血清学诊断方法 类型 诊断应用举例 直接凝集试验 伤寒和副伤寒（肥达试验）、立克次体（外斐试验）、钩端螺旋体（显微凝集试验） 乳胶凝集试验 检测脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等抗体 沉淀试验 梅毒（VDRL、RPR试验） 补体结合试验 检测Q热柯克斯体等抗体 中和试验 风湿热（抗O试验） ELISA 广泛用于病原体的诊断和流行病学调查 * 病毒感染的微生物学检查法 临床感染常见病原体检查 真菌感染(fungi infection) 1.直接检查：孢子与菌丝 2.分离培养 3.血清学检测 4.分子生物学检查 G试验 (1-3)-β-D-葡聚糖是真菌的重要组成成份, 广泛存在于除接合菌之外的真菌细胞壁中,占真菌细胞壁成分的50%以上。深部真菌感染时,(1-3)-β-D-葡聚糖可从胞壁中释放出来,进入血液及其他体液中,即可以检测到其中的(1-3)-β-D-葡聚糖水平异常升高。而浅表真菌感染或真菌定植时血清(1