NGFBDNF和NT3在鸡胚背根节神经元发育中的表达研究.pdfVIP

王廷华倪师今1 李 明 冯忠堂 昆明医学院神经科学研究所 1第一附属医院神经外科 【摘要】 目的：探讨NGF，BDNF，NT一3与DRG神经元发育的关系。材料和方法： 28期(5日龄)来亨鸡胚的腰段背根节制作20肿厚冰冻切片，分别用 取Hamburger 5 性反应呈色。观察3种生长因子在鸡胚背根节神经元的分布。结果：在E d的鸡 胚DRG神经元。没有发现NGF的免疫阳性细胞，但在神经元的中枢支和周围支观 察到NGF—IR。与之比较，部分神经元内有BDNF和NT一3的免疫阳性反应物，但 两者分布的细胞类型有差异。前者主要分布于一些中小神经元，而大细胞阳性者较 少。后者则主要分布于一些大神经元，但也见少数中小神经元阳性染色。结论：三种 生长因子在DRG神经元的配布各有其主要的靶细胞群，提示它们的作用可能与 DRG神经元的不同细胞亚群有关。 BDNF 【关键词】NGF NT一3背根节神经元鸡胚 在发育期，一个基本的现象是神经元的增殖与死亡相伴，从而保证了细胞数目的相对稳 定。其中，由靶提供的有限数量的神经营养因子(neurotrophic 存活起着重要作用。诸多证据已表明，NTFS不仅影响发育期神经元的存活，而且对成神经前 体细胞的增殖和分化亦起重要的调控作用。甚或影响发育阶段神经细胞的新陈代谢。体外实 derivedneu． 验已证实神经生长因子(nervegrowthfactor，NGF)，脑源性神经营养因子(brain rotrophic root (dorsal 的发育有关。本文探讨NGF，BDNF和NT一3在E5d鸡胚体内DRG神经元的表达，以了解 3种生长因子与DRG神经元发育的关系。 1材料和方法 取Hamburger 滴度1：3 000)，BI)NF(SalltaCruz，滴度1：500)，NT一3(SantaCruz，滴度1：1500)兔抗血清， 对各组切片进行ABC法免疫组化染色，DAB棕色阳性反应呈色。常规脱水封片后，观察计数 。云南省自然科学基金(97C011R)资助课题 ·-——235·—-—- 抗，其他步骤不变，结果阴性。 2结果 在E5d的鸡胚DRG神经元，没有发现NGF的免疫阳性细胞，但在神经元的中枢支和外 者分布的细胞类型有差异。前者主要分布于一些中小神经元，而大细胞阳性者较少。后者主 要分布于一些大神经元，但也见少数中小神经元阳性染色。BDNF和NT一3的免疫阳性反应 物均定位于神经元的细胞浆内(图1，图2)。 图1BDNF的免疫阳性反应物在DRG神经元(十J×200 图2 2,OO NT一3的免疫阳性反应物在DRG神经元【十)X 3讨论 5 我们在E d的背根节神经元没有发现NGF阳性细胞，但却观察到不少BDNF和NT二3 的阳性神经元。其中，BDNF阳性细胞大多是中小神经元，而NT一3者则主要是大神经元。 表明3种生长因子在DRG神经元的配布有差异。提示它们对发育中的神经元可能各有其特 异的靶细胞亚群。 3．1 NGF与DRG神经元发育 至今，关于NGF促进胚胎发育中体外培养神经元存活、生长的文献已有诸多报道，表明 5 NGF为胚胎神经元发育过程所必需。然而，我们在Ed的鸡胚DRG则未观察到NGF—IR。 提示，此时DRG神经元所需的NGF可能由外周靶或中枢靶提供。本文在DRG神经元的中 枢支和外周支观察到NGF的免疫阳性反应物支持了这种可能。 其他文献表明，胚胎发育期背根节神经元的靶组织表达NGF和其mRNA。且NGF的水 平可影响靶组织的神经