中国明对虾胚胎及幼体死亡病因的电镜检查及防治意见研究.pdfVIP

中国甲壳动物学会编辑 甲壳动物学论文集第四辑 甜学士盥讧2003午出版 TRANSACTIONSOFTHECHINESECRUSTACEANSOCIETYNo．4 PP．381～389 中国明对虾胚胎及幼体死亡病因的 电镜检查及防治意见+ 王克行1 李晓甫2 姜 明1 刘晓云1 (1中国海洋大学．青岛266003 2威海国际经济技术合作股份有限公司。威海264200) 摘要：近年中国明对虾的苗种生产愈加困难，较普遍地存在虾卵孵化率低和幼体死亡率高 的问题，即便是勉强培育出的虾苗。养成初期的成活率也很低，致使中国对虾育苗和养成 处于困境。为探寻其原因，作者利用电子显微检测技术，对亲虾、卵及各期幼体进行了跟 踪调查，发现在亲虾卵巢、畸形胚胎及患病幼体体内存在一种球状病毒及一种质型短扦状 病毒，在仔虾体内还观察到支原体的寄生，认为它们是造成目前对虾育苗中卵子不孵化及 幼体大量死亡的主要原因。并认为该两种病毒的传播方式，既有垂直传播，也有水平传播÷ 根据以上传播途径，提出不仅应重视对亲虾的选择和对卵子的消毒，更应重视对无节幼涔 进行有效的消毒。 关键词：中国明对虾球状病毒质型短杆状病毒支原体 中国明对虾Fenneropenaeus 良的珍贵虾类。20世纪80年代初研究成功中国对虾苗种生产技术之后，我国的对虾苗 种生产突飞猛进地发展起来，生产的虾苗不仅满足了飞速发展的养虾业的需要，而且每 年还可向近海大量放流虾苗，中国对虾苗种生产技术的突破，促进了我国对虾养殖业和 增殖业的发展。但是，近年来在北方沿海中国明对虾的苗种生产愈来愈困难，主要问题 是卵的孵化率下降，甚至完全不孵化，涵状幼体以后各期幼体变态困难，死亡率高，许 多过去育苗很好的育苗场，现在育不出虾苗，经济损失十分惨重。因此，该问题引起人 们的关注，有人认为其原因是亲虾培育不利和育苗池水环境条件控制不利，也有人提出 是近海水环境受污染造成的，还有人认为是种质退化，但均未见到足以说明问题确凿的 实验依据，因而问题也就悬而未决。作者拟从寄生生物查找原因，利用电子显微技术， 检查了青岛地区对虾育苗不顺利的几个育苗场的亲虾、卵子及各期对虾幼体，在亲虾、 畸形胚胎与病弱幼体体内检测出两种病毒，在仔虾体内还观察到支原体，认为它们是造 成对虾卵及不同阶段幼体发育障碍的主要原因，本文报告研究结果。 ·根据刘瑞玉院士关于对虾类新分类命名意见。将中国对虾改为中国明对虾。 ·383· 一、材料与研究方法 1．标本的采集与处理 标本是于1998年4～5月期间，采自青岛市红岛镇后阳育苗场及上马镇对虾育苗 场，亲虾样品是选择活力差、不摄食的亲虾活体解剖，取其卵巢、肝胰脏、肠、鳃、肌 肉等组织器官，在洁净的载玻片上用刀片迅速切成0．5mm3左右的小块，即刻投入 2．5％戊二醛溶液中固定。卵子和幼体是采取正常和畸形虾卵及正常和病弱的各期幼体， 用2．5％的戊二醛溶液整体固定，在冰瓶中保存带回实验室，在冰箱中4C恒温保存。 2．样品的制备及检查电镜 待检材料在2．5％的戊二醛中固定，再用1％锇酸固定1h，经梯度乙醇脱水，用 Eponl2渗透、包埋，使用LKB。NOVA超薄切片机切片，醋酸铀、柠檬酸铅双重染色， 在日立H一7000透射电子显微镜下检查并摄影。 一 多士 审 一、}口7K 1．球形病毒的形态及危害 在亲虾的肝胰脏、鳃组织、畸形胚胎、不健康的无节幼体、糠虾幼体及仔虾体内的 细咆质内，均检测到球形病毒粒子的存在(图1—1～6)，病毒粒子直径为80～100nm， 具囊膜，核心部分呈现中等电子密度，在受感染亲虾的肝胰脏、中肠及肌肉组织的细胞 质内还可以观察到病毒包涵体的存在，数量较多，一般1～5个。该病毒的增殖主要在 细胞质中进行，其形态结构与薛清刚(1996)报道的中国对虾呼肠孤病毒类似。 球形病毒侵染细咆的细胞器与细咆核都可以观察到明显的病理变化