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文心兰组培快繁技术的研究

摘 要 文心兰是一种观赏价值极高的高档兰花,除了少数盆栽之外,最适宜用作切 花,专供各种形式的艺术插花之用。但目前由于工业化培育文心兰的整体水平不 高,关键生产环节技术薄弱,造成了文心兰繁殖系数偏低,工业化生产效率不高t 许多名贵品种相对短缺,供不应求,市场售价极高。对于文心兰组织培养的研究 将是解决这一问题的关键环节。 本实验以文心兰根蔸为外植体诱导丛生芽,探索通过以丛生芽途径再生植株 的方法进行快速繁殖。对外植体灭菌、丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根壮苗、炼 苗移栽等过程中各影响因素进行了研究。研究的主要问题集中在对不同外植体的 选择、不同灭菌方法的选择、不同基本培养基类型及培养方式的选择、不同激素 配比和用量的选择、不同添加物的选择、不同碳源以及不同活性炭用量的选择等 多个方面。主要采用正交设计安排试验。本文意图通过上述研究,进一步扩大文 心兰外植体选择范围,提高丛生芽增殖系数,寻找出组培快繁各阶段的主要影响 因素和最佳培养基配方,筛选出最优技术参数组合,建立文心兰最优再生体系, 进而提高文心兰商业化生产效率,解决目前市场上文心兰供不应求的问题,为文 心兰工厂化育苗提供技术支持。 结果表明:以文心兰根蔸为外植体,最佳的灭菌方法流程是:根蔸—÷.自来 水冲去泥沙—,洗衣粉上清液浸泡10分钟并用软刷刷去表面污垢—,自来水冲洗1 小时一置于超净工作台上一70%酒精30s一无菌水冲洗3次—,0.2%Hgcl2浸 8min--’无菌水冲洗8次—+吸干水分—+接种。无菌率达到84.62%。 影响文心兰根蔸诱导丛生芽的主要因素是细胞分裂素BA和天然添加物,其 NAA0.4mgL‘较优。诱导根蔸外植体发生丛生芽最适宜的培养基配方是 +糖309L。+琼脂8.09L~+pH5.4。诱导率平均达83.33%。 影响文心兰丛生芽增殖的主要因素有基本培养基、BA、NAA、苗高、丛植 密度、活性炭、培养基的酸碱度以及苗处理方式。其中,基本培养基选用MS、 右高的小苗,苗基部竖向切割处理,并且按每瓶接种4株的丛植密度接种可以明 显促进丛生芽增殖;培养基中添加1.0~2.09L’1的活性炭,培养基的酸碱度调至 5.1~5.4,也可明显促进丛生芽增殖。次要因素有天然添加物,以椰乳汁150mlL。 或番茄汁150mlL。较好。而无论是食糖、蔗糖还是葡萄糖对丛生芽增殖的影响 差别不大,都可选择。丛生芽增殖最适宜的培养基配方是 50mlL。1或番茄汁1 50mlL“+VcO.2mgL“ MS+BA4.0mgL~+NAA0.4mgL。+椰乳汁l 54。 椰乳汁150rolL。1或苹I裂7t 脂8.09L一+pH5,4。 促进苗生长的培养基为KC+NAA0.2 炭1,09L。+糖309L。+琼脂8.09L~+pH5.4。 rolL。+活性炭1.09L。+糖309L。+琼脂8.09L~+pH5.4。 文心兰炼苗移栽时,移栽初期在树皮基质中培养,待新萌发的根达到一定的 数量后,再移栽到水苔基质中进行株高和假鳞茎的培养。成活率达100%,且假 鳞茎饱满,植株健壮。 关键词:文心兰 丛生芽 外植体 组织培养 II Abstract are as Oncidiumone value fewofthemused is of veryhigh arethusas.Though the basin ofthemaresuitableto flowers.However flowers,most cutting propagation

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