甲状腺转录因子1TTF1与肺癌相关性研讨.pdf

甲状腺转录因子-I(TTF-I) 与肺癌相关性研究 吴西雅余健民 摘要：目的：通过对肺癌细胞及对照组肺上皮细胞TTF一1表达的研究，明确其是否能成为 肺癌早期诊断、分型及分期的特异性检测指标。方法：选取手术切除肺癌99例，对照组21例， 制作组织蕊片，切片后进行免疫组织化学检测，根据免疫染色结果，细胞表达TTF一1分为阴性一 验进行统计学分析。结果：肺癌组TTF一1的强阳性表达率明显高于对照组(PO．05)，小细胞肺 关性，(Po．005)。结论：TT卜1可作为鉴另q肺癌和非肺癌、小细胞癌与非小细胞肺癌及肺癌发展 的不同阶段的相对特异的检测指标。 关键词：甲状腺转录因子、肺癌、相关性 近年来，肺癌对人类健康的危害日益严重，其发病率及死亡率也急剧上升，已成为欧美死亡 的首要原因。因此，肺癌的早期诊断、分型与分期是我们面临的首要问题。甲状腺转录因子是单 基因位点编码的38-KDa核蛋白质，是甲状腺滤泡上皮细胞中发现的一个转录因子，但它在肺组织 中也同样存在。川它主要分布于终末呼吸道并终生表达。啦¨副研究表明，起源于正常表达1vrF_1 细胞的肿瘤仍保留表达这个转录因子的能力。删本次研究就是通过分析TTF．1在肺癌及对照组中， 在小细胞肺癌与非小细胞肺癌及I、II、ⅡI期肺癌中的不同表达，以明确其是否能成为肺癌早期 诊断、分型及分期的特殊性异性检测指标。 材料与方法 1．标本来源。选取2001年至2004年在我院接受切除手术的病例，其中，对照组(肺炎、肺 结核等)21例，肺癌组99例。根据世界卫生组织关于肺部肿瘤的组织学诊断标准，99例肺癌分 为小细胞肺癌12例．非小细胞肺癌87例，后者包括腺癌16例，肺泡细胞癌16例，大细胞肺癌 6例。鳞癌33例，类癌3例，炎性假瘤2例，腺鳞癌3例。根据修订的国际肺癌分期系统进行术 后病理分期，分为I期38例，II期33例，Ⅲ期28例。所有病例中，男性86例，女性34例。小 于60岁69例，大于或等于60岁51例。 ’ pen、Mayer’s 均购自福州迈新生物技术开发公司。 3．方法。 3．1肺组织蕊片的构建和制备 3．1．1蕊片的设计：按不同的组织种类设计样品排列方式。从上至下，从左至右，依次为对 照组、腺鳞癌、腺癌、肺泡细胞癌、大细胞癌、炎性假瘤、小细胞癌、类癌、鳞癌。 3．1．2组织蕊片模块的制备：将熔化的石蜡制成4．5cmX2cmXlcm大小的空白蜡块，设计15 ．．297．． ×8的组织列阵，用打孔机钻孔制成模块。 3．1．3组织蕊片的制备：在所选病例的标本蜡块中选取有意义的部位，用打孔仪钻取组织并 转移至模块对应的孔位上，制成所需的阵列蜡块，排布成组织蕊片。然后将组织蕊片面朝下放在 11 铜板上，于55℃放置30分钟，轻压模块使组织柱在模块中排平。对组织蕊片蜡块切成4‘5m的 切片并平整地粘贴于载玻片上。 3．2免疫组织化学分析：使用兔1vrF_1抗血清进行免疫组织化学检测。染色前将要与1vr卜1抗 体孵化的切片进行微波加热。在再水合作用与内源性过氧化酶抑制作用后，切片与正常山羊血清 孵育过程在室温下进行，”F一1抗体(1：200稀释)2小时，生物素标记的羊抗兔30分钟，抗生物 素蛋白一生物素过氧化物酶复合物30分钟，和底物溶液孵育，以3，3二氨基联苯二胺作为色原。 切片经Mayer苏木精复染，脱水，二甲苯透明，以Eukitt封片，然后观察、计数并记录显示“核” 染色的肿瘤细胞可分数。依据免疫染色结果，肿瘤划分为三组，++强阳性组，≥50％的肿瘤细胞 以免疫反应细胞数中位数150作为区分强阳性组与弱阳性组的优化分割点。 3．3采用卡方检验进行统计学分析。 结果 1．肺癌组与对照组TTF-1的表达检测结果比较见表1。 表1 肺癌与对照组TTF-I的表达结果比较 对照组肺组织上皮细胞1vrF—l