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第8章 发酵过程控制 北京科技大学 化学与生物工程学院 生物科学与工程系 8.1 发酵过程控制概述 常规的发酵工艺控制参数有温度、pH、搅拌转速、空气流量、罐压、液位、补料速度及补料量等。 能表征发酵过程性质的直接状态参数有pH、溶解氧（DO）、溶解CO2、氧化还原电位（rH），尾气中的O2和CO2含量、基质（如葡萄糖）或产物浓度、代谢中间体浓度、菌体浓度。 通过直接状态参数可以求得发酵体系中各种间接状态参数，如比生长速率、摄氧率、CO2释放速率、呼吸商、氧得率系数、氧体积传质系数、基质消耗速率、产物合成速率等。 8.1 发酵过程控制概述 一般发酵过程的优化控制实施的具体步骤可以通过以下四步来完成。 ①确定能反映过程变化的各种理化参数及其检测方法 ②研究这些参数的变化对发酵生产水平的影响及其机制，获取最佳范围和最适水平 ③建立数学模型定量描述各参数之间随时间变化的量化关系，为发酵过程优化控制提供依据 ④通过计算机实施在线自动检测和控制，验证各种控制模型的可行性及其适用范围，实现发酵过程的最优控制 8.1 发酵过程控制概述 8.1.1 发酵过程的参数检测 发酵过程参数的检测方式： 1、利用仪器进行在线检测 pH电极、溶氧电极、温度电极、液位电极、泡沫电极、尾气分析仪等 2、从发酵罐中取出样品进行离线检测 分光光度计、pH计、温度计、粘度计、气相色谱、液相色谱、色质联用等 8.1 发酵过程控制概述 8.1.1 发酵过程的参数检测 发酵过程直接状态参数 能直接反映发酵过程中微生物生理代谢状况的参数，如pH、DO、溶解CO2、尾气O2、黏度等。 发酵过程间接状态参数 采用直接状态参数计算求得的参数，如比生长速率、摄氧率、呼吸商等。更能反映发酵过程的整体情况，间接测量是许多测量技术、控制和其他先进控制生物反应器方法结合的过程。 8.1 发酵过程控制概述 8.1.1 发酵过程的参数检测 离线发酵分析方法 所得的过程信息是不连贯和滞后的，但离线分析在发酵过程中十分重要。 8.1 发酵过程控制概述 8.1.2 发酵过程的代谢调控 大肠杆菌细胞，同时存在2500种左右蛋白，每个细胞只能装约10万个蛋白质，即平均每种酶不到100个分子。 组成酶 诱导酶 微生物细胞的代谢调节方式：调节营养物质通过细胞膜进入细胞的能力，通过酶的定位以限制它与相应底物接近，调节代谢流等。调节代谢流（1、酶的合成量，“粗调”；2、现有酶分子的催化活力，“细调”） 8.2 温度对发酵的影响及其控制 8.2.1 影响发酵温度的因素 引起温度变化的原因是由于发酵过程中所产生的净热量，称为发酵热 Q发酵=Q生物+Q搅拌+Q通气-Q蒸发-Q辐射 生物热是指微生物在生长繁殖过程中，本身产生的大量热量 8.2 温度对发酵的影响及其控制 8.2.2 温度对微生物生长的影响 在微生物最适温度范围内，生长速率随温度升高而增加。当温度超过最适生长温度，生长速率将随温度增加而迅速下降 不同生长阶段的微生物对温度的反应不同，处于延迟期的细菌对温度的影响十分敏感。将其置于最适生长温度附近，可以缩短其生长的延迟期，而将其置于较低的温度，则会增加其延迟期。对于对数生长期的细菌，从一般适温菌来看，如果在略低于最适温度的条件下培养，既有利于菌体的生长，又避免热作用的破坏。处于生长后期的细菌，一般其生长速度主要取决于溶解氧的浓度，而不是温度，因此在培养后期最好适当提高通气量。 8.2 温度对发酵的影响及其控制 8.2.3 温度对基质消耗的影响  温度的改变可以影响基质的消耗与比生长速率。  8.2 温度对发酵的影响及其控制 8.2.4 温度对产物合成的影响  从酶反应动力学来看，发酵温度升高，酶反应速率增大，生长代谢速度加快，但酶本身容易因过热而失活，表现在菌体容易衰老，发酵周期缩短，影响最终产量。温度会影响发酵液的物理性质，影响氧的溶解度和基质的传质速率以及养分的分解和吸收速率，间接影响产物的合成。 温度对代谢有调节作用，有时会影响生物合成的方向。不同温度下得到的产物类型不同。 8.2 温度对发酵的影响及其控制 8.2.5 最适温度的选择  最适于菌的生长或产物的生成的温度 由于适合菌体生长的最适温度往往与发酵产物合成的最适温度不同，故经常根据微生物生长及产物合成的最适温度不同进行二阶段发酵。 变温培养 8.3 pH对发酵的影响及其控制 8.3.1 发酵过程中pH变化的规律 发酵过程中，pH是动态变化的，这与微生物的代谢活动及培养基性质密切相关。  发酵液pH的改变①会导致微生物细胞原生质体膜的电荷发生改变，对个别离子渗透性的改变，从而影响微生物对培养基中营养物质的吸收