邻菲罗啉分光光度法测定铁lz.pptVIP

熟悉分光光度测定铁的基本原理和方法； 掌握分光光度法测定物质含量的条件选定方法； 掌握分光光度计的组成部分，操作操作方法和注意事项。 掌握邻菲罗啉分光光度法测定铁的标准曲线以及实际样本的检测 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢；酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。通常在pH值~5的缓冲液介质中测定。 仪分实验 实验一 邻菲罗啉分光光度法测定铁 * * 邻菲罗啉分光光度法测定铁 仪器分析实验 （可见分光光度法） 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法是研究物质分子在紫外-可见光区分子吸收光谱的分析方法。 单色光 照射 吸光物质溶液 透射光强度 I0 It 可见分光光度法 紫外分光光度法 紫外-可见光区（200~800nm） 紫外光区（200~400nm） 可见光区（波长400~800nm） 紫外-可见分光光度法 朗伯-比尔定律 A =εb c 浓度 厚度 吸光系数 吸光度 Sample (conc. C) Path length b I0 It Lambert-Beer 定律是说明物质对单色光吸收的强弱与吸光物质的浓度（C）和 液层厚度（l）间的关系的定律，是光吸收的基本定律，是紫外-可见光度法定量的基础。 Lambert-Beer 定律: 当一束平行的单色光通过溶液时，溶液的吸光度 (A) 与溶液的浓度 (C) 和光程 (b) 的乘积成正比。 一、实验目的 二、实验原理 在pH=2～9的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，其反应如下： 此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。 间接检测法 邻菲罗啉-Fe2+配合物 4Fe3++2NH2OH·HCl═4Fe2++N2 +H2O+4H+ +2Cl- 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 提问：如何分别检测Fe3+和Fe2+？ ? 三、仪器和试剂 分析天平 722型分光光度计 pHS-3B型酸度计 容量瓶 50、250ml 移液管 10、25ml 烧杯 50ml 吸耳球 铁标准溶液（CFe3+=10?g/ml） 铁标准溶液（CFe3+=0.001mol/L） 10%盐酸羟胺水溶液（临用新配） 0.1％邻菲罗啉水溶液（临用新配） 0.02％（≈0.001mol/L）邻菲罗啉水溶液（临用新配） 1mol/L NaAc缓冲溶液 0.57 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 辐射源 分光系统 检测系统 单波长单光束分光光度计 记录装置 1. 光源： 钨灯或卤钨灯——可见光源 350~1000nm 氢灯或氘灯——紫外光源 200~360nm 2. 单色器（分光光度计心脏）　　 作用是将来自光源的光按波长的长短顺序分散为单色光并能随意调节所需波长的光。主要由入射狭缝、准直镜、色散元件、物镜和出射狭缝组成。 3．吸收池：样品池，比色皿 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置 5．记录装置：讯号处理和显示系统 数字显示 荧屏显示 表头显示 标准曲线法 要 求： 1. r 0.999 2. n 5-7 3. 待测浓度尽量在标准曲线中间位置 代入线性方程中求得C样 配溶液很重要 四、实验步骤 (一）条件试验 1、吸收曲线的绘制，选择最大吸收波长作为测定波长（510 nm) 注：铁标样：0.00 mL、5.00 mL, 依次加入10%盐酸羟胺溶液、NaAc溶液和0.1%邻菲罗啉溶液，稀释至刻度，摇匀。 2、邻菲罗啉铁配合物的稳定性，绘制A-t曲线（先增大，再平台）； 3、显色剂浓度的影响，绘制A-V曲线(根据A =εbc判断A的变化趋势， 1份Fe2+对应3份邻菲罗啉）；注：铁标样：10.00 毫升 4、溶液酸度对配合物的影响，绘制A-pH曲线（pH=2～9）。 注：pH2一个点（1）， pH 2-9取2个点， pH9一个点（8） 5、根据以上实验，得出最佳条件。 (二）铁含量的测定 1、 用吸量管分别准确地吸取不同体积的铁标准溶液（8个），依次加入10%盐酸羟胺溶液、NaAc溶液和0.1%邻菲罗啉溶液，稀释至刻度，摇匀。放置10min，以不加铁的试剂空白溶液为参比溶液，在510nm处分别测定各溶液的A。以铁含量为横坐标，相