酶工程第10章固定化酶催化的动力学特征.pptVIP

第十章 固定化酶催化的动力学特征 一、酶的固定化对其动力学特性的影响 一些酶在溶液中和固定化后的米氏常数值 酶活性变化的评价指标 2．酶稳定性的变化 二、影响固定化酶动力学的因素 影响固定化酶动力学的因素 影响固定化酶动力学的因素 分配效应中的分配系数 静电作用造成的分配效应 考虑静电作用的反应速度方程 影响固定化酶动力学的因素 外扩散和内扩散 固定化酶底物和产物的分布状况 酶的本征动力学 固有动力学 有效动力学 几种动力学之间的关系 固定化酶反应动力学的特征 三、外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 外扩散限制效应 四、内扩散限制效应 1．载体的结构参数 微孔半径的计算 载体的结构参数 载体的结构参数 体积相当直径 外表面积相当直径 比表面积相当直径 形状系数ψ 载体的结构参数 2．物质在微孔内的扩散 分子扩散与努森扩散 微孔内液体分子的扩散速率 分子扩散系数与有效扩散系数 曲节因子 位阻因子 大分子的受阻扩散 某些底物在生物凝胶中的有效扩散系数（水溶液） 3．微孔内反应组分的浓度分布 （1）质量衡算方程 壳层质量衡算 推导质量衡算方程的前提条件 壳层质量衡算方程的推导 壳层质量衡算方程的推导 壳层质量衡算方程的推导 （2）作图法求[S]i值和Vi值 根据 ，底物在固 定化酶外表面的浓度应同时满足传质速率方程式和反应速度方程式，因此也可通过作图法求出 值和相应的 值。 对于固定于多孔性载体中的固定化酶，其催化反应的主要部位是在颗粒内部。内扩散阻力主要来自于微孔内的阻力。这种内扩散阻力的大小与固定化酶颗粒内部的物理结构参数、反应物的性质等因素有关。 在讨论内扩散对固定化酶催化反应动力学的影响时，常将均匀分布着酶的多孔球形颗粒作为研究的模型。因此要首先研究颗粒载体的结构参数和物质在微孔内的扩散。 a．比表面积Sg 它指单位质量载体所具有的内表面积，以m2/g表示。通过实验测定，一般载体的比表面积可达200～300m2/g 。 b．微孔半径 多孔载体的内表面积与微孔孔径的大小有关。孔径越小，比表面积越大。若单位质量载体所具有的孔体积以Vg表示，则平均微孔半径为 设微孔为圆柱状管道，长为l，半径为r ，则其内表面积（不算两端） 孔体积 两式相除 ， c．孔隙率 载体的孔隙率为载体颗粒内孔隙所占有的体积与该颗粒体积之比。因此 值恒小于1，它在数值上与Vg的关系为 。式中 为表观密度，它表示单位颗粒体积中所含有的固体的质量。 d．颗粒当量直径 为了表示不同形状固定化酶颗粒的大小，一般采用如下方法： ① 以与颗粒体积相等的球体直径dV 表示，称 为“体积相当直径”； ② 以与颗粒外表面积相等的球体直径dS 表示， 称为“外表面积相当直径”； ③ 以与颗粒的比表面积相等的球体直径dSV 表 示，称为“比表面积相当直径”。 对于同一非球形颗粒，按上述不同定义表示的当量直径在数值上是不同的。假设某任一形状的固定化酶颗粒，其体积为VP，外表面积为AP，则根据上述定义的各当量直径分别为： 体积相当直径dV 外表面积相当直径dS 比表面积相当直径dSV 描述颗粒形状可引入形状系数的概念，用ψ表示。其定义为与颗粒体积相同的球体的外表面积AS与颗粒的外表面积AP之比，即ψ＝ 。 由于体积相同的几何体中球体的外表面积最小，所以一般是AS AP，ψ1。如果颗粒就是球体，则ψ＝1。ψ表示了任意颗粒的外形与球体相接近的程度，故又称为圆球度。 正方体颗粒的圆球度为0.806。 e．颗粒密度 颗粒密度有3种定义方法： 颗粒表观密度 固体的质量/颗粒的体积 颗粒真密度 固体的质量/固体的体积 颗粒堆密度 固体的质量/床层的体积 上述3种密度的差别在于体积计算的不同，显然存在 。 分子在微孔内的扩散分为两种机理： ①一种称为分子扩散，此种扩散的阻力来自于分子之间的碰撞，扩散速率主要受分子之间相互碰撞的影响，而与微孔直径的大小无关。 ②另一种称为努森（Knudson）扩散，其扩散的阻力主要来自于分子与孔壁之间的碰撞，而分子之间的碰撞影响较小。它常发生在微孔直径较小的情况下。 微孔内某一组分进行