201010607072-一种熊胆提取物、制备方法及其在制备治疗脂肪肝药物中的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102552325A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102552325 A (43)申请公布 日 2012.07.11 (21)申请号 201010607072.4 (22)申请 日 2010.12.27 (71)申请人 福建归真堂药业股份有限公司 地址 362142 福建省泉州市惠安县净峰镇工 业区 (72)发明人 陈海峰 张晓坤 陈志鸿 罗强 许光辉 孙翠玲 陈丽玲 吴德培 (74)专利代理机构 北京元本知识产权代理事务 所 11308 代理人 叶凡 (51) Int.C l. A61K 35/413 (2006.01) A61P 1/16 (2006.01) 权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 2 页 权利要求书1 页 说明书8 页 附图2 页 (54) 发明名称 一种熊胆提取物、制备方法及其在制备治疗 脂肪肝药物中的应用 (57) 摘要 本发明涉及一种从中药熊胆粉中得到的提取 物及其在制备治疗脂肪肝药物中的应用。本发明 采用提取溶剂对熊胆粉进行提取，将提取溶液干 燥后依次进行大孔树脂柱分离和硅胶柱层析，制 得熊胆提取物，其中牛磺熊去氧胆酸的含量达到 65％以上；本发明制备的熊胆提取物能够有效地 降低高脂饮食脂肪肝大鼠肝匀浆中甘油三酯和胆 固醇的含量，在治疗脂肪肝方面具有良好的应用 前景。本发明熊胆提取物制备方法简单，成本低 廉，为治疗脂肪肝提供了一种新的药物来源。 A 5 2 3 2 5 5 2 0 1 N C CN 102552325 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1. 一种熊胆提取物的制备方法，其特征是包括如下顺序进行的步骤 ： 1) 采用甲醇或乙醇对熊胆粉进行提取，制得熊胆醇提物 ； 2) 将熊胆醇提物依次进行大孔树脂柱分离、硅胶柱层析，即得。 2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是步骤1) 中所述的甲醇或乙醇的体积与熊胆 粉的重量之比为5-20 ∶1。 3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征是步骤2) 中所述大孔树脂柱分离包括如 下步骤 ： A) 向熊胆醇提物中加入蒸馏水，溶解，制成熊胆水溶液； B) 将熊胆水溶液上大孔树脂柱，进行梯度洗脱，分离，其中流动相依次为蒸馏水、质量 百分比浓度为95％的乙醇溶液，分别收集洗脱液； C) 将流动相为质量百分比浓度为95％的乙醇溶液的洗脱液蒸干，得到熊胆树脂柱分 离物。 4.如权利要求3所述的制备方法，其特征是步骤B) 中所述大孔树脂为极性或非极性大 孔树脂。 5.如权利要求3所述的制备方法，其特征是步骤B) 中所述大孔树脂柱内的大孔吸附树 脂与熊胆醇提物的重量之比为10-20 ∶1。 6.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征是步骤2) 中所述硅胶柱层析包括如下步 骤 ： A) 将经过大孔树脂柱分离后的熊胆树脂柱分离物，拌入硅胶，干燥得到硅胶层析样 品； B) 将硅胶层析样品置于硅胶柱顶部，以体积比为99 ∶1-0 ∶1 的氯仿- 甲醇混合溶液 为洗脱剂，进行硅胶柱梯度洗脱，收集洗脱液； C) 收集体积比为4 ∶1 的氯仿- 甲醇混合溶液为洗脱剂的洗脱液，蒸干，即得。 7.如权利要求6所述的制备方法，其特征是步骤B) 中所述硅胶柱内的吸附剂硅胶与熊 胆树脂柱分离物的重量之比为10-30 ∶1。 8.如权利要求6所述的制备方法，其特征是步骤B) 中所述的洗脱剂为体积之比依