HPLCDADESIMS鉴定茯苓中的三萜成分.pdfVIP

3．2流动相中甲醇浓度的改变对各成分的色谱行为具有显著的影响，甲醇浓度增高时，各成分的保留时间 tR显著缩短；反之，则明显延长。 参考文献 [1]张勇忠，郑晓珂、冯卫生等镇痛汤活性成分的研究中草药2002，33(2)，106—109 148 [5]王浴铭，朱风云，汪茂田等咽喉草化学成分的研究．中草药1987，18(10)，434—435 HPLC／DAD／ESI—MS鉴定茯苓中的三萜成分 于能江，郭继芬，赵毅民(军事医学科学院毒物药物研究所，北京 100850) HPLC指纹图谱可以较全面的说明药用植物(或中药)中的化学成分，因而比现有的普遍以一两个主要 成分的定性和定量作为质量标准的方法更能保证中药的质量稳定和安全。而二极管阵列检测(DAD)和质 谱(MS)检测技术与HPLC联用，可以在化学成分分离的同时，在线提供每个谱峰的紫外图谱和质谱信息。 在多数情况下，通过对比文献数据或与标准化合物对照可以鉴定各谱峰的化学成分结构L1j。因而，HPLC／ DAD／MS联用技术可以为得到谱峰化学成分结构基本明确的HPLC指纹图谱提供有效帮助。 茯苓(Porio J。中外学 肪酸、甾醇及酶等【2J。三萜类成分具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节、止吐和胰岛素作用增强等作用L3 者对其进行了大量研究，分离得到了大量化合物。其结构类型分为两类：羊毛甾烷三萜烯型(见图2)和3，4 一开环一羊毛甾烷三萜烯型(仅存在于茯苓皮中)。羊毛甾烷三萜烯型从环内双键上可以区分为两类：8位 环上16位及其边链上有无羟基或乙酰氧基取代。从以上结构分析中可以看出，只要具备紫外图谱和一定的 鉴定茯苓中三萜化学成分的方法。 1材料与方法 1 1仪器与药材 3000三级四极杆串联质谱仪，配有Turbo 1．1数据 美国应用生物系统公司API lonsprav源以及Analyst 1100高效液相色谱系统，配有四元梯度泵，DAD紫外检测器，自动进样器。 处理系统。Agilent 鉴定。乙腈为色谱醇，水为二次重蒸馏水，其它试剂为分析纯。 1．2实验方法 1．2．1色谱条件色谱柱：HYPERSIL 检测(离子源喷射电压：+4000V；离子源温度：300℃)。 Sephadex 206 20．2mg,用甲醇定容至2mL，0．45pm滤膜过滤后进行分析。 2结果 2．1 HPLC—DAD分析结果 紫外检测波长选用210rim和242nm，所得色谱图见图1。各色谱峰的紫外吸收特征见表1。 表1 HPLC谱图中各色谱峰的保留时间、紫外吸收、负离子和正离子扫描质谱信息以及经鉴定的化学成分结构 NO tH(min) UV(rim) MS(neg)nl／z MS(pos．)m／z Strue‘ 27 注‰最犬吸收玻长；b与色谮峰是否一致段有确定；12．数字代号为图2中的箔构代号；d3—0一苯甲酰基一16a一羟基去氢齿孔酸(3 acid)，28 —0一benzoyldehydrofⅢ10sic16一O一乙酰基多孔酸c(16—0一Aeetylpolyporenie 烯～21一酸甲酯(3．16a—Dihytlroxyianosta一7，9(¨)．24一trlen一21一ole 构，缺乏足够证据。 2．2 HPLC—MS分析结果 在负离子全扫描一级质谱图中，检测到了每个色谱峰的[M—H]一离子(见表1)，而且没有碎片峰出现。 表1)。 2．3色谱峰中化学成分的鉴定 207 图1茯苓样品的HPLC(紫外检测波长分别为242nm(上图)和210nm(下图)) acid)。 合物3相符，因而鉴定该色谱峰中的化学成分为齿孔酸(Ebur