关于生物检测传感器类型、基本原理及主要应用的文献整理+沈玉杰.docVIP

关于生物检测传感器类型、基本原理及主要应用的文献整理报告 ****** ****** 1 DNA电化学传感器 1.1 基本原理 电化学 DNA传感器一般由一个固定 DNA片段的电极和用于检测的电活性杂交指示剂构成 。在适当条件下 ,利用两条互补的 DNA单链间的特异性相互作用 ,使电极表面上已知序列的 DNA片段 (DNA探针 )与溶液中的待测序列 DNA (靶序列 )发生杂交 ,通过杂交前后电活性指示剂的电化学响应的变化进行测定 ;或使电极表面的靶序列与溶液中的已标记电化学活性物质的 DNA探针杂交 [27 ]来测定靶序列。在电极表面的 DNA双螺旋结构形成后 ,该传感器还可用于检测那些与 DNA双链有着特殊亲和力的电活性小分子。 1.2 主要应用 1.2.1 DNA损伤研究 DNA损伤是指由于化学物质的作用或受辐射而引起的 DNA磷酸核糖骨架的断裂 ,磷酸、核糖或碱基的损伤等。 DNA损伤种类繁多 ,仅氧化损伤一类 ,目前已证实的就有 100多种 [79 ]。由于 DNA损伤会极大地扰乱生物体正常的生理活动 ,所以 ,很久以来就是生化研究的一个重点。 Palecek等曾在 1996年[80 ]和 1998年[81 ]两次对用于 DNA损伤研究的 DNA传感器进行了综述 ,并认为基于汞电极的传感器最适合于 DNA损伤的研究。 2000年 ,他们又用悬汞电极发展了一种新的 DNA传感器用于监控由 Fenton反应所造成的 DNA链的断裂。 1.2.2 环境污染监控 众所周知,许多环境污染物的毒性就表现在它们与DNA 间的相互作用,因此,DNA 传感器可被用于环境中污染物的监控。Wang 等在1997 年曾对这一方面的发展进行了综述[83 ] ,提出了3 种检测方案: ⑴利用固定的双链DNA 修饰层使电活性污染物在电极上优先富集; ⑵检测由污染物键合引起的电极表面修饰核酸内在氧化信号的改变; ⑶对于非电活性的分析物,可通过它与一电活性物质在DNA 修饰电极表面的结合竞争来进行测定。其后,Krull 等又利用基于双层类脂膜(BLMs) 的电化学DNA 传感器来检测环境中黄曲霉素M1和肼类物质，其中黄曲霉素M1 的检测限达到0. 5 mmolPL ,而肼类物质的检测限更达到μgPL 级。 1.2.3 病原基因检测 人类的许多传染性疾病是由环境中的病毒、病菌或寄生虫引起的,所以,病原基因的测定也是电化学DNA 传感器的一个重要研究领域。例如,在发展中国家每天约有11000 名儿童死于由隐孢子虫引起的腹泻,Wang 等利用一段38 个碱基的低聚核苷酸探针制备了一种隐孢子虫DNA 传感器,通过计时电位溶出法检测,检测限可达到ng 级[84 ] 。同样的方法也可被用于检测大肠杆菌、爱滋病毒和结核杆菌等。Ozsoz 等研制出一种乙肝病毒DNA 传感器,用示差脉冲伏安法验证了该传感器对特定序列DNA 片断的选择性。Azek 等制备了巨细胞病毒的基因传感器,其检测结果比凝胶电泳灵敏23000倍,比比色杂交试验灵敏83 倍[。Ivnitski 等对用于食品工业中病原细菌检测的电化学传感器的原理和应用作了总结,并对该方面未来的发展进行了展望。 1.2.4 基因疾病诊断 现代医学的研究成果表明 ,许多疾病 ,如癌症和遗传病等的发生都与基因的突变有关。 Hashimoto等将一段 20个碱基的探针固定于金电极 ,制备了一种用于致癌基因 vzmyc序列检测的电化学传感器 ,实验结果证明其效果很好。Wang等通过一段固定在传感器上的 17个碱基的肽核酸 PNA探针完成了抑癌基因 P55的点突变检测。Bardea等在金电极上组装了一个 3组分的低聚核苷酸修饰层 ,通过法拉第阻抗谱法发展了一种家族蒙性白痴症的特效生化传感器。 2 压电石英晶体传感器 2.1 基本原理与结构 压电石英晶体传感器是利用石英晶体作为基底的体声波器件在厚度剪切模式振荡过程中与周边环境的相互作用, 由器件超高频声波的声电阻抗谱、频谱或相位等参量变化对环境介质如质量、粘弹性、导纳、介电或流变特性等物理化学性能作出相关应答并转换成相应的检测信号。 2.2 压电石英晶体生物传感器的应用 2.2.1 压电石英晶体免疫传感器　 它是利用石英晶体微天平对表面质量负载的高度敏感性和抗体特别是单克隆抗体与其相应抗原之间的特异识别功能相结合的生物传感器。应用中一般采用固定抗体来检测抗原, 应用较多的是单克隆抗体。单克隆抗体是针对抗原某一决定簇的抗体, 只与其相应的抗原决定簇结合, 有效地避免了抗原抗体交叉反应的出现,赋予了压电石英晶体免疫传感器对检测物质的特异识别并结合的基础。近年来, 压电石英晶体免疫传感器应用于医学实验诊断的报道很多。 2.2.2 用于凝血检查的压电石英晶体传