芳香族氨基酸添加提高井冈霉素产量的研讨.pdfVIP

200 中国抗生素杂志2013年3月第38卷第3期 文章编号：1001-8689(2013)03—0200．04 芳香族氨基酸添加提高井冈霉素产量的研究 魏振华1钟建江t，2， (1华东理工大学，生物反应器工程国家重点实验室，上海200237； 2上海交通大学微生物代谢国家重点实验室，上海200240) 摘要：目的 通过添加芳香族氨基酸促进井冈霉素生物合成起始单位的供应，提高其发酵产量。方法 优化苯丙氨酸添加 时间和浓度确定最优添加条件，分析前体代谢相关的酶活考察其影响机制。结果 确定苯丙氨酸最佳添加条件为在发酵第24h 添加O．1g／L。发现37~C时苯丙氨酸的添加提高了井冈霉素A产量，但在42~C条件下提高幅度大大降低。通过分析6．磷酸葡萄糖脱 氢酶酶活，发现芳香族氨基酸添加并未影响其酶活。结论 苯丙氨酸的添加能有效提高井冈霉素发酵产量近60％。苯丙氨酸的 添加可能通过反馈抑制降低了戊糖磷酸途径中中间体的消耗，从而为井冈霉素合成提供了更加充足的7．磷酸景天庚酮糖。 关键词：井冈霉素；吸水链霉菌；芳香族氨基酸；6．磷酸葡萄糖脱氢酶；戊糖磷酸途径 中图分类号：Q819 文献标志码：A Enhancedvalidamycinproductionbyadditionofaromaticaminoacid WeiZhenh·uaandZhongJian-jiang， (1StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering，EastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shanghai200237； 2StateKeyLaboratoryofMicrobialMetabolism．andSchoolofLifeSciences Biotechnology, ShnaghaiJiaoTongUniversiyt,Shanghai200240) Abstract 0bjective Toenhancevalidamycinproduction，aromaticaminoacidwasaddedtothemediumto increasethesupplyofprecursorforvalidamycin．M ethods Phenylalanine，tryptophanandtyrosinewereaddedto themedium tostudytheeffectofaromaticaminoacidsonvalidamycinproduction．Additiontimeandconcentration ofphenylalaninewereoptimizedtofindouttheoptimalcondition．Theglucose一6一phosphatedehydrogenase(G6PDH) activitywhichrelatedtovalidanycinprecursormetabolism wasanalyzedtostudyitsmechanism．Results Theresults showedthatphenylalaninehadthebesteffectonvalidamycinproduction．Tlleoptimalconditionwas0．1g／Lphenylalanine addedat24h，whichenhancedvalidamycinproductionby60％．Theadditionofphenylalanineehnancedvalidamycin productiongreatlyat37℃．butnotSOmuchat42℃．G6PDH activitywashigherat42℃ than37℃，anditwas foundthatt