肌肉注射小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导小鼠细胞和体液免疫的研讨.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 型应答，具有免疫佐荆作用p‘，本实验观察到的空载体对照组外周血T淋巴细胞对conA的 刺激具有明显的反应进一步证实了这一点。 差异 CD|+T淋巴细胞是免疫系统主要的调节细胞。小鼠在免疫pcDNA击P、，．、，P3基因痰苗 d 后，兰个剂量组在第14cD4+T淋巴细胞数量开始升高，第28d达到最大值后下降。且6pg 组效果最为明显。 3pg组其次、lpg组较差，三个荆量组之间表现出一定的剂量依赖性。 基因疫苗在机体内表达的蛋白能反映抗原的高级空间结构，可l三l诱导cDg+T淋巴细胞 介导的免疫应答pJ。cDl+T淋巴细胞，能够分化为cTL以识别和溶破表达抗原的靶细胞， 且cTL介导的溶破作用似乎是摧毁病毒感染细胞的主要机制。小鼠在免疫pcDNA母PvwP3 基因疫苗后，本实验三个免疫剂量在第21．35d时其cDl+T淋巴细胞数量都高于空载体和生 理盐水对照组，且它们之间存在剂量相关性． cDs+T淋巴细胞从免疫后第2ld到第35d都高于对照组。许多病毒包括猪细小病毒ll”感染 后能够导致宿主淋巴细胞亚群变化，引起宿主的免疫应答。虽尚未见GPv感染宿主后淋巴 细胞亚群动态变化的研究。但本实验仍能表明pcDNA．GPv．vP3没有引起机体的细胞免疫抑 制，而是产生了较强的由cD4+和CDl+T淋巴细胞介导的细胞免疫应答。 3．4免疫剂量对基因疫苗免疫效果的影响 ： 基因枪轰击免疫途径是通过基因枪将由金颗粒包裹好的质粒轰击进入表皮后，DNA随 之进入细胞。溶解并表达。表达的抗原受到与皮肤相关的淋巴组织的监视．通过抗原呈递最 终引起机体的免疫应答f1“。1992年，协g等人首次报道将编码人生长激素基因的质粒用基 因枪轰击途径免疫小鼠可以引起体液免疫【I“。随后，Hui等(1994)用外科方法使动物组织 暴露，然后用基因枪将MHcH-2Kb分子直接轰击入组织内首次证明了该免疫途径可以诱导 机体产生细胞免疫。且可以检测出特异性的细胞毒性T淋巴细胞介导的免疫应答Il卅。研究 表明，基因枪轰击免疫使用基因疫苗剂量少，仅为肌注用量的l，250-l，2500，即可获得理想 的免疫效果【l”。由此可见该方法是一种高效的免疫方式，既可以诱导机体产生体液免疫， 也可以诱导机体产生细胞免疫。但还没有研究报道基因枪轰击途径不同免疫剂量间的关系， 由本实验可知，基因枪轰击6“g组能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答．3pg组次之，l “g组较差，各组之间具有一定的剂量相关性。 参考文献略 肌肉注射小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导小鼠细胞和 体液免疫的研究 卢菲。，程安春1·r．汪锚书1·”，韩新锋。，黎教1，车茜’，列晓来1．陈孝跌1-2 (1．四川农业太学动物抖技学院禽藕防治研究中心．四川，雅安。625014；2．动物疫病与人类健康四川省重 点实验室。四川．雅安．625014) 用淋巴细胞转化实验(椰法)争漶式细胞仪(EAcs)分别检测小鼠外J田血T淋巳细胞转化致果和cD，． 接ELIsA法)检测小鼠特异性啪抗体．蛄果表明pcDN椭Pv．vP3以肌肉逢径免疫小鼠能够诱导机体产 生良好的细胞免疫和体洼免疫应蕃． 关键词小鹅疽病毒v”基因疫苗肌肉注射小置细胞免疫体泣免疫 ’为通讯作者 禽娄传染病 小鹅瘟(GoslingPlague，GP)又称鹅细小病毒(Go∞eP8rvovjms，GPV)感染或DeI翟秽’s 病，是由小鹅瘟病毒(GoslingPla酣Ⅵ^甄GPV)引起的一种主要侵害小鹅和雏番鸭的高 度接触性传染病，以严重腹泻、肠道出现纤维素性、出血性和坏死性炎症为主要临床和病理 特征，是严重危害养鹅业的重要传染病之一，每年都有不同程度的流行，给养殖户造成了相 当大的经济损失．GPv基因组的右侧开放阅读框架编码三种结构蛋白(vP)，即VPl、v1)2、 vP3。其中vP3约占OPv衣壳蛋白的78．5％，是GPv主要的免疫原性蛋白，也是研制基园 工程疫苗的首选基因Ilj．肌肉注射作为基因疫苗的一种有效免疫途径已被大量研究所证实陋 测小鼠外周血淋巴细胞转化效果，cDr、cD，T淋巴细胞动态变化和血清IgG抗体水平，为 阐明在该免疫途径下小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导