苦参毛状根及愈伤组织培养研讨.pdfVIP

跬压 论文题目： 苦参毛状根及愈伤组织培养研究 学科门类：工 学 一级学科：化学工程与技术 培养单位：生命科学与工程学院 硕士生：刘瑶 导师：齐香君教授 201 2年5月J。卜．J月 T STUDIESoN RooTS soPHoRA AThesisSubmittedto Shaanxi ofScienceand University Technology in PartialFulfillmentofthe forthe of RequirementDegree Masterof Engineeringscience． Thesis Xian n u a——-i Q—i． Supervisor：Professor May，2012 苦参毛状根及愈伤组织 摘要 苦参(Sophoraflavescens Linn．) 落叶灌木，是我国传统中药之一。主要分布在山西、陕西、北京、黑龙江、 甘肃、河北、湖南、广西、四川等地。苦参具有清热燥湿、杀虫、利尿等 功能。现代医学研究表明，苦参中的苦参碱和氧化苦参碱具有良好的抗癌 活性，对黑色素瘤、膀胱癌、胃癌等均有不同程度的抑制作用，目前以苦 参和其有效成分为原料开发了多种制剂并广泛用于临床。苦参生长周期需 2．3年，加之苦参制剂的深度开发，苦参药材的市场需求量不断增加，其价 格由2003的2．5元涨到2011的14元左右，在近几年内翻了4倍多，突显 了苦参资源可持续发展的问题。本论文开展苦参毛状根培养体系研究，为 解决苦参资源问题探索新途径。 本论文研究了苦参毛状根的诱导、继代培养条件及苦参愈伤组织的诱 导和增殖培养条件；并采用高效液相色谱分析法，对苦参毛状根及愈伤组 织中苦参碱及氧化苦参碱含量进行了测定。研究结果如下： 1．高效液相色谱法测定苦参碱及氧化苦参碱含量的色谱条件为：色谱 4．6 NH2 柱：氨基柱(Hypersil 速：lmL／min；进样量：15止；柱温：室温。 1．75％。 2)在所述条件下，氧化苦参碱的保留时间为15．9min。氧化苦参碱在 99．12％，RSD为1．90％。 2．苦参毛状根的最佳诱导条件为：以幼芽为外植体，在R1601菌液中 苦参毛状根的诱导率为28．6％。 3．苦参毛状根继代培养条件：以改良的1／2MS为培养基，蔗糖为碳源， 此条件下苦参毛状根生长较好。苦参毛状根中氧化苦参碱的富集量为 1．79mg／g(苦参毛状根干重)，未检测到苦参碱。 4．苦参愈伤组织最佳诱导条件：以苦参幼芽为外植体，培养基MS+