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草莓生物技术育种研究进展 高清华张学英叶正文 (上海农科院林术果树研究所，上海201106) 摘要综述了国内外生物技术在草莓育种研究中的应用进展，内容包括基因转化、细胞悬浮 培养、原生质体培养、花药培养、离体胚培养、突变体筛选等。认为应用生物技术是草莓品 种改良的重要手段。并提出草莓生物技术育种存在问题及其发展方向。 关键词草莓；生物技术；育种 a1147tⅧa 草莓(FragariaDucE)是蔷薇虫或抗病基因)的导入，导致了新的基因型的 科(Rosaeeae)草莓属(Fragaria)多年生草出现或实现基因型的改良，可选育出抗虫或抗 本植物，据不完全统计，目前全世界约有草莓 病基因型的新品系。 品种2000多个。草莓品种改良多采用常规杂 目前已经分离或应用的目的基因主要有3 交育种技术。但育种周期长，选择效率低。虽 大类。有关外源基因导人植物细胞的方法有多 然近年来传统育种方法在提高草莓品种的产 种，如农杆菌质粒介导法(包括TI质粒和彤 量、品质方面取得了一些进展，但生产上仍然 质粒)、植物病毒载体介导法、DNA直接导人 缺乏抗病虫、抗逆境和抗除草剂的优良品 法(包括PEG介导、脂质体介导等化学诱导 种等‘“。 DNA直接转化法、电激法、超声波、显微注 近年来发展起来的现代生物技术为草莓育 射、激光微束、基因枪法等物理诱导DNA直 种提供了新途径，它可以获得常规育种难以或 接转化法等)和种质系统介导基因转化法(包 无法得到的新类型，从而创造出新种质”o。生 括花粉管导人法、生殖细胞浸泡法、胚囊、子 物技术应用于植物育种是随着植物组织培养技 房注射法等)。目前最常用且最为有效的方法 术的发展而兴起的。草莓的组培开展较早，近 为根癌农杆菌介导法和基因枪法。自1983年 年来在分子、细胞和器官水平等方面的研究取 首次用农杆菌介导法在烟草和马铃薯上取得成 得了突破性进展，并将成为草莓品种改良的重 功以来，约有120种植物采用此方法进行转 要手段。本文就生物技术在草莓育种研究中的 化。农杆菌介导法对双子叶植物十分有效，但 进展作以综述。 在单子叶植物中也已开始应用。基因枪法既可 以愈伤组织为受体，又可以悬浮细胞为受体， 1 草莓的遗传转化研究进展 并且对单双子叶植物都十分有效。目前转基因 分子生物学的飞速发展，导致了植物科学 技术得到成功应用的树种有导人外壳蛋白基因 的一场新革命。经过多年的探索，人们从分子 获得抗病毒植株的番木瓜”3，PEG介导法获得 水平对生物学和遗传学有了深刻的认知，与组 的转基因柑橘”1，利用农杆菌介导转化成功的 培技术相结合，分子生物学技术已开始应用于 转基因苹果…、草莓…、葡萄…、桃…等。邓 植物基因组的修饰和改变。由于基因编码的同 馨等”·报道，以再生频率较高的草莓品种为材 一性，任何有机体内(如病毒、菌类、昆虫) 料，采用叶盘法，用含有标记基因NPTII和报 的有用基因都可转入到植物体。单基因(如抗 宏观评述 导，得到了抗卡那霉素的抗性芽，初步鉴定是 立遗传连锁图谱是辅助选择的重要手段，并且 转化芽．转化频率为14．5％。尽管从理论上讲具有速度快、效率高的优点。用一套引物可对 任何植物的组织都能被转化，但许多植物转化 许多种类进行基因分析，不必进行分离、克隆 后再生率很低，目前的转化和筛选方法对离体 DNA探针，分子杂交膜制备和核苷酸顺序的测 培养有一定的抑制或破坏作用，因此对于离体 定。目前，利用RAPD标记，或与同工酶标 培养困难的植物要建立一套有效的转化体系并 记、RFLP标记相结合，已建立了苹果、葡萄、 非易事。转化频率低、转移基因的非企望异常 桃、核桃、草莓、越橘等果树的遗传连锁 表达、编码多基因的较大DNA片段的导人方图谱。 法的建立以及重复性较强的高效再生体系的缺 2草莓的细胞悬浮培养研究 乏是转基因技术应用的限制因