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过程象种籽胚发芽后的子叶苗破心一样长出真叶状叶片,大多数则是长成形状各异的培养物,并逐渐在
各不相同的部位形成不定芽,还有少数胚状体在生芽培养基中变黄,或虽然保持绿色但不产生不定芽。
不定芽产生后可切下不定芽用生芽培养基继代培养,并对每个胚状体编号,当同一胚状体诱导出
5~8个芽后即可转入生根培养基(含蔗糖2%及0.2mg/LNAA的MS培养基)。
不同萝h组合的花药在诱导单倍体胚状体阶段,最适培养基差异较大,而在生芽、生根培养阶段在
相同培养基上的长势无明显区别,说明萝h不同基因型主要对小孢子的发育状态及小孢子胚的形成过程
表现出差异。
1.3关于单倍体幼苗的人工加倍问题,因我单位以育种为主要目标,而且萝b单倍体培养物在再生过
程中自然加倍率在70%左右,因此我们没有专门进行倍性检测和人工加倍,而我们的诱导对象全为杂
交组合,只要试管苗白交后代不分离即为双单倍体纯系,对这些纯系进行田间品比,筛选出优良纯系,
经组合力测定,筛选出配合力强的纯系即可作为亲本材料进行杂交制种。当然如果单纯进行理论研究,
还有必要对花药培养诱导出的胚状体进行染色体数目鉴定。
14萝b单倍体培养再生苗在10月中旬~11月上旬定植成活率较高,在加盖农膜及遮阳网的大棚中,
晴口下午定植并加盖小拱棚(大棚农膜只盖顶部,四周敞开),3天后小拱棚两端开始通风。5~7天后
捣去小拱棚,能保证50%以上的成活率。
1.5萝b单倍体培养再生苗春季开花授粉期单株间表现有一定的差异,2/3左右的单株授粉结荚良好,
1,4左右为无粉株,其中一部分植株经异花授粉亦能结籽,男一部分单株虽经异花授粉亦不结籽,还有
部分植株花蕾大,花瓣宽且厚,虽有花粉但结荚、结籽较少。
参考文献:
1 王怀名等,嫩茎花椰菜花药和花粉培养中的胚胎发生,华北农学报 1992,7(4):61~67
2 柳 俊,马铃薯花营大小与花粉发育关系的研究,马铃薯杂志,1997,7(4):202~205
3 栗根义等,丈白菜游离小孢子培养,园艺学报 1993,20(2):167~170
4 刘公社等,高温对大白菜小孢予培养的影响.植物学报 1995,37(2):140~146
5 古旭等,培养基和基因型对粳籼稻杂交种花培的影响,华北农学报,1992,7(4):57~60
萝I\雄性不育花粉母细胞减数分裂过程的研究
张丽1李霄燕2魏毓棠3
(1北京市蔬菜研究中心,北京,100089;2山西省种子总公司,山西太原,030006;3沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈
阳,100t61)
摘要: 以萝h雄性不育株与可育株为试材,比较研究了不育与可育花粉母细胞的减数分裂过程。结果发现,不育
花粉母细胞在第二次减数分裂后期,染色体行为出现异常,即在分向两极时,出现了不均等分裂现象。这是导致后期小
孢子败育的一个潜在原冈。
关键词: 萝h 雄性不育减数分裂小孢子发育
萝h雄性不育系是选育优良一代杂种的重要手段。在我国已发现10多个萝p雄性不育系及保持系
J40
全垦蔓蔓堡堕!登兰查堕堡室 一
并已利用其选育出了许多优良的一代杂种用于生产。关于萝h雄性不育的细胞学研究有利于了解败育机
理,为化学杀雄和化学保雄提供理论依据。粟翼玟研究发现:秋萝h不育系中从四分体初释放的单核小
孢子正常,当单核小孢子内开始出现小液泡时即呈现败育11]。张丽等对春夏萝h雄性不育小孢子的细胞
形态学进行了研究,发现绒毡层细胞的高度液泡化是导致小孢子败育的一个重要原因口J。许多学者也进
行了相似的研究,而且均认为萝h小孢子败育发生在四分体后,而四分体之前的小孢子发育正常。花粉
母细胞减数分裂后形成四分体的过程是小孢子发育的一个重要阶段,该过程的正常直接影响小孢予的发
育。但关于不育花粉母细胞的减数分裂过程是否正常却未见报道。本文研究了萝h雄性不育花粉母细胞
减数分裂过程,旨在进一步从染色体水平上揭示败育机理,以便为萝h雄性不育系的研究与利用提供理
论依据。
1材料与方法
1.1小孢子发育时期的观察:石蜡切片法观察小孢予发育时期,铁矾一苏木精染色,以确定花蕾殴与小
孢子发育时期的关系。
1.2花粉母细胞减数分裂过程的观察:取主茎花序的花蕾,从中选取不同发育时
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