基因枪介导小麦条锈菌毒性突变的研究.PDFVIP

( ) 第 35 卷 　第 5 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 Vol . 35 No . 5 2007 年 5 月 J ournal of Nort hwest A F U niver sit y (Nat . Sci . Ed . ) May 2007 基因枪介导小麦条锈菌毒性突变的研究 张如佳 , 王 　阳, 王美南, 井金学, 李振岐 ( 西北农林科技大学 植保学院, 陕西 杨凌 7 12 100) [ 摘 　要] 　为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株 , 应用基因枪转化技术 , 以小麦条锈菌野生 白化菌系为 ( ) 转化受体 , 以含有潮霉素抗性基因 H y g 的质粒为插入载体 ,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究 。 结果表明 ,当小麦条锈菌夏孢子萌动 2 h ,可裂膜承载压力为 1 100 Psi 时进行轰击转化 ,所得的小麦条锈菌夏孢子在 含有潮霉素的培养基上萌发率最高 ,为 36 . 09 % 。进一步将转化的小麦条锈菌夏孢子进行扩繁 ,在筛选品种上筛选 , 将筛选到的突变体在其上继代培养 4 代 ,获得了两个稳定的毒性突变菌株 MM2 、MM3 。MM2 菌株对南大 24 19 的毒性 减弱 ,反应型由野生菌系的4 型变为 2 型 ;MM3 菌株在南大 24 19 的反应型由野生菌系的4 型变为 2 、3 型 ,毒性发生分 化 。采用中国鉴别寄主对突变体的毒性研究表明 ,各突变菌株的毒性均较原始菌系发生了明显改变 。进一步用 H y g 基因特异 PCR 在两个突变菌系中均扩增到目的片段 ,表明 MM2 、MM3 的突变是由 H y g 基因插入引起的。 [ 关键词] 　小麦条锈菌 ; 基因枪 ; 毒性变异 ; 插入突变 [ 中图分类号] 　S435 . 12 1. 4 + 2 [文献标识码] 　A [文章编号] 　167 19387 (2007) Mut ations induce d by bioli stic s affecting virulence in Puccini a striiformi s Z HAN G Ruj ia ,WAN G Yang ,WAN G Meinan ,J IN G J inxue ,L I Zhenqi ( ) Col leg e of P l ant P rotect ion , N ort hw es t A F Uni vers ity , Yang l i ng , S haanx i 7 12 100 , Chi na Abstract : In or der