湖南石菖蒲水提液部位HPLC特征指纹图谱研究.docVIP

精品论文 参考文献 湖南石菖蒲水提液部位HPLC特征指纹图谱研究 赵曦1 周晓东2 （1吉林大学珠海学院 519041; 2珠海市食品药品监督管理局 519000） 【摘要】目的 建立湖南石菖蒲水提液部位HPLC分析色谱条件，建立水提液部位标准指纹图谱。方法 色谱条件：Waters Cosmosil C18色谱柱(4.6mmtimes;250mm，5mu;m)；流动相：甲醇：3%三乙胺（磷酸调PH到4.0）=56:44；检测波长：245nm；柱温：28℃；流速：1.0ml/min；进样量：15mu;l。结果 标定共有指纹峰6个，峰型较好，峰面积稳定，相似度均在0.90以上,与其他成分分离较好。结论 方法准确性可靠，重现性好，可用于石菖蒲药材水提液部位的指纹图谱研究。 【关键词】石菖蒲 水提液 指纹图谱 HPLC 【中图分类号】R282.71 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）15-0023-03 石菖蒲来源于天南星科Araceae菖蒲属Acorus 植物石菖蒲Acorus tatarinowii Schott的干燥根茎,根茎中主要含有挥发油，故多重视其挥发油成分的研究。但根据近年来有关石菖蒲水提液部位现代药理研究的报道，其开窍豁痰、醒神益智、化湿和胃的功效并不局限于挥发油部位。有研究表明石菖蒲水提液对抗抑郁[1]、抗癫痫[2]及小鼠吗啡依赖戒断[3]具有一定疗效。本文所用石菖蒲来源于湖南，采用水蒸气蒸馏法，去除挥发油得到水提液部位，二极管阵列对最佳检测波长进行筛选，确定相关色谱条件，建立湖南石菖蒲水提液部位特征指纹图谱，报道如下。 一 材料 1，样品来源 样品收自湖南邵东县药农，产自附近丘陵，海拔约200米，分为个子货及饮片，带少量泥土，完整者根茎分叉，数量2～5个不等；表皮红棕色，粗糙，节1.5～3cm；断面微红色，内皮层环纹明显，可见维管束小点及棕色油点；气芳香，香气浓。经珠海市药监局主任药师、广州中医药大学客座教授周晓东鉴定为天南星科植物石菖蒲的干燥根茎。采收时间及规格见表1： 表1 10批湖南石菖蒲药材采收时间及规格 2，仪器与药品 美国Agilent 1200 series 二极管阵列检测器；日本岛津LC-2010A高效液相相色谱仪；甲醇：色谱纯，购于天津四友生物医学技术有限公司；三乙胺：分析纯，购于广州化学试剂厂；磷酸：分析纯，购于广州化学试剂厂；正丁醇：分析纯，购于广州化学试剂厂；水：超纯水。 二 方法 1，色谱条件 Waters Cosmosil C18柱(4.6mmtimes;250mm，5mu;m)；流动相：甲醇：3%三乙胺（磷酸调PH到4.0）=56:44；检测波长：245nm；柱温：28℃；流速：1.0ml/min；进样量：15mu;l；指纹图谱采集时间60min。 2，供试品溶液的制备, 取药材5g，粉碎成1～2cm的粗粒，加20倍量的水，水蒸气蒸馏法提取挥发油10小时，弃去挥发油，收集水提液部分，滤过，滤液减压浓缩至1.10～1.15(50℃)，用等量水饱和正丁醇提取4次，合并正丁醇液，减压回收正丁醇，残留物真空干燥（-6.86Kpa，70℃），用水溶解，定容到10ml量瓶中，0.45mu;m微孔滤膜过滤，进样15mu;l。 3，方法学考察 为了考察分析方法的可靠性，选取编号2、3、4的样品，分别对其仪器精密度、稳定性和实验方法重复性作了相应考察。 （1）精密度试验 取供试品溶液，连续进样6次，相似度值均为1.000，各共有峰的相对保留时间和相对保留峰面积的相对标准偏差（RSD）小于3%，结果表明仪器精密度良好。 （2）稳定性试验 取供试品溶液，分别于配制后0h、12h、24h、48h进样，相似度值均在0.990～1.000之间，各共有峰的相对保留时间和相对保留峰面积的相对标准偏差（RSD）小于3%，结果表明供试品溶液在室温下放置48h稳定。 （3）重现性试验 将同一药材样品按2.2项下依法制成5份进样，相似度值均为1.000，各共有峰的相对保留时间和相对保留峰面积的相对标准偏差（RSD）小于3%，结果表明重现性良好。 三 HPLC指纹图谱的建立 1，参照物的选择 取批号石菖蒲药材，按2.2项下配制供试品溶液，在上述色谱条件下，进样分析，得到HPLC指纹图谱，见图1。由