输血前血型血清学检验PPT.pptVIP

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输血前血型血清学检验PPT

抗体筛选 对受血者作抗体筛选的目的是检出有临床意义的抗体,并可在配血前有足够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液,避免盲目配血。 方法是用受检者血清与试剂红细胞起反应,以发现在37℃有临床意义的抗体。 如抗体筛选试验阳性,缺乏谱细胞鉴定其特异性时,可送有条件的单位鉴定。 抗体筛选 抗体鉴定试验包括: 自身细胞检查:确定患者血清内是否有自身抗体或自身抗体与同种抗体并存; 使用试剂谱细胞:谱细胞一般是由8~16单人份的已知血型表型的O型红细胞配套组成,具有各种不同的抗原成分; 根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体。 交叉配血 主侧交叉:由患者血清和供者红细胞组成; 次侧交叉:由患者红细胞和供者血清(浆)组成(由于我国尚未对供者进行抗体筛选,故次侧交叉是有必要的,尤其是输全血时); 自身对照:由患者自身血清和患者自身红细胞组成(自身对照有助于分析解释交叉配血试验中出现的阳性结果)。 凝聚胺试验原理 凝聚胺(Polybrene)是一种阳离子聚合物,溶解后能产生很多正电荷,可中和红细胞表面负电荷,引起红细胞非特异性凝聚,这种凝聚是可逆的; 如果是抗体致敏的红细胞在凝聚胺作用下发生凝集,这种凝集是不可逆的; 交叉配血 在凝聚胺试验中,首先让红细胞和血清在低离子介质中孵育,促进抗体与红细胞抗原结合,然后加入凝聚胺使红细胞凝聚,再加入枸橼酸钠重悬液(枸橼酸根带负电荷)中和凝聚胺正电荷,恢复红细胞表面的负电荷; 重悬后如果是非特异性凝聚,则由于红细胞表面负电荷的排斥作用,红细胞散开,结果为阴性;若是由于抗原抗体引起的特异性凝集则不会散开,结果为阳性。 交叉配血 凝聚胺试验的注意事项 加入重悬液后,应尽快观察结果,最好在1min内,最长不要超过3min,以免弱反应消失; 凝聚胺溶液若放玻璃瓶中太久作用会变弱,所以必须保存在黑色塑料瓶中; 凝聚胺是一种抗肝素药物,所以使用含肝素的血标本要稍稍多加一些凝聚胺来中和肝素。 交叉配血 交叉配血实验中,离心力、离心时间不当,可造成假阴性或假阳性结果。 恒温水浴箱温度不正确也会造成错误结果。 对于高效价O型血清出现前带现象时,应当用EDTA盐水适当稀释,以阻止补体C1引起的凝集。 出现溶血或部分溶血应判为阳性结果(标本本身溶血例外)。 交叉配血 含有冷凝集素的患者交叉配血时可采用37℃生理盐水洗涤3次,如还显弱凝集,再用42℃或45℃盐水洗1次再配血。 温抗体型的自身免疫性溶血性贫血患者血清中的游离抗体有时很难吸收完全,导致配血困难。在排除同种抗体的情况下可选择凝集反应弱的同型血液输注,亦可输注O型洗涤红细胞。 交叉配血 某些紧急情况下需要快速配血,建议血清(血浆)与细胞比例为2:1,细胞悬液浓度为2%~3%。同时离心前孵育2~5min,有利于检测弱的ABO抗体。 婴儿输注O型血或ABO同型血,应当采用母亲的血清(血浆)进行交叉配血。 交叉配血 在任何情况下,一定要选择ABO和Rh(D)同型的血液。如果同型血不够用,可以输注O型相合的添加剂红细胞(红细胞悬液、悬浮红细胞),这种红细胞所含血浆量很少。 AB型血液不能满足供应,可选择A型或B型红细胞,尽量不用O型,O型红细胞以备它用。 交叉配血 Rh(D)阴性血不够用,可以选择Rh(D)阳性血,但有生育能力的妇女不能用。 在大量输血时如果输的是同型相合的添加剂红细胞(未输全血),供者之间可以不做交叉配血试验。若是输了ABO不同型的相合红细胞,以后要尽快输注与患者同型的红细胞,不要坚持一直应用ABO不同型的相合红细胞。 交叉配血 * 输血前血型血清学检验 输血前要做三项检查: 血型鉴定; 抗体筛选; 交叉配血试验。 目的有二: 使输入的血液成分有效存活; 不会引起受血者的红细胞发生破坏。 三者有互补作用,缺一不可。 在检验医学中,没有几项检验像输血前检验一样, 临床医生几乎完全依赖其结果的正确性。 输血前检验的每一个环节均可能发生差错,标本搞 错最为常见。 给患者输入不相容的血液成分导致严重不良后果: 急性溶血反应:多由ABO血型不相容输血引起,人 为差错是其主要原因; 迟发性溶血反应:多由ABO以外血型不相容输血所 致,输血前检验不规范是其主要原因。 常规ABO血型鉴定应包括正反定型,二者起到互 相验证和质控的作用。 ABO正定型采用单克隆抗-A、抗-B血型试剂,抗- B试剂不应该与获得性B抗原反应。 ABO、RhD血型抗原检测 ABO、RhD血型卡检测 每个血型检测卡都带自身质控(ctl)对照,实质就是一个阴性质控。如果是阳性,则检测结果无效。 优点为: 避免病人自身凝集引起误判结果。 监控操作规范性。 监测试剂卡质量。 ABO、RhD血型抗原检测卡 4+ 表示RBC绝大部分凝聚于凝胶表层。 3+ 表示RBC多数凝聚于凝

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