实验八、理化因素对微生物生长的影响1.pptVIP

实验八、不同pH对大肠杆菌生长的影响紫外线对微生物的杀菌作用 学习和掌握研究理化因素对微生物生长影响的一般程序和方法 学习和掌握利用浊度法测量微生物生长的方法； 了解不同pH、紫外线对大肠杆菌生长的影响。 目的和要求 pH对微生物生长影响的一般规律 生长pH范围： 最适生长pH 最高生长pH 最低生长pH 配制定量体积的不同起始pH液体培养基 灭菌 定量接种 摇床振荡培养 测定生长量 研究pH对微生物生长影响的一般程序 细菌、酵母菌：分光光度法（浊度法） 丝状微生物：重量法 分光光度法（浊度法）测定微生物生长量 原理：在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与光吸收值(OD)成正比，菌数越多， OD越大。因此，借助于分光光度计，在一定波长下测定菌悬液的OD ，就可反应出菌液的浓度。 测定方法：直接测定细胞培养物在600nm光吸收 重量法 原理：将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来,洗涤后，烘干至恒重(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。 不同pH对大肠杆菌生长的影响 配制牛肉膏蛋白胨液体培养基（每组300mL） 将上述培养基分成五等份，pH分别调到3、5、7、9、11、分装于5个三角瓶（50mL/瓶）和5支试管 （5~10ml/支） 包扎 121℃灭菌20分钟，冷却 接种（0.5ml/瓶大肠杆菌过夜培养物） 37度，180rpm 震荡培养24小时，测定光吸收值（OD600) 配制牛肉膏蛋白胨平板培养基（已配好，每组一个） 涂布菌悬液 紫外线照射（10min） 报纸包好 37度恒温培养箱中培养 观察 紫外线对大肠杆菌的杀灭作用 实验报告 对实验结果进行记录和分析。 微生物学实验考核内容 操作1：显微镜的正确和熟练使用方法；细菌的制片和单染色、酵母菌、霉菌、放线菌的简易制片染色方法；放线菌、重要霉菌青霉、曲霉、根霉的显微形态特征（特别是特征性结构）；四大类微生物的菌落特征鉴别 操作2：无菌接种、分离纯化、倒平板、超净工作台使用等 操作3、培养基配制、分装、琼脂融化、包扎、棉塞、无菌水、酒精棉球等制作、消毒灭菌